绿豆环氧水解酶基因克隆、表达及酶学性质表征

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环氧水解酶(Epoxide hydrolase, EH)能催化合成光学纯环氧化合物和邻位二醇,在医药、绿色精细化工等领域具有重要应用前景。近年新发现的绿豆EH (mbEH)能对映归一性水解消旋环氧化物产生单一构型的R-邻位二醇,底物转化率与立体选择性达90%以上,是更一种实用的生物催化剂。本论文首次获得了一种mbEH的编码序列,实现了该基因在大肠杆菌中的克隆与高效表达,对重组绿豆EH进行了纯化和酶学性质表征。首先,比较了UNIQ-10柱式法、Trizol法和改良Trizol法对绿豆种子、绿
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