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几丁质酶（chitinase）是一类催化水解N-乙酰葡萄糖氨聚合物中β-1，4糖苷键的酶。几丁质酶能有效降解大多数真菌细胞壁的重要组分之一的几丁质，因此，几丁质酶的抗菌作用备受人们关注，前人的研究也表明超量表达几丁质酶基因能提高植物对病原菌的抗性。本研究以毕赤酵母为表达系统，制备丝状真菌球孢白僵菌（Beauveria bassiana）几丁质酶Bbchit1，研究了Bbchit1对部分植物病原真菌孢子萌发和菌丝生长的抑制作用。同时通过根癌农杆菌介导将Bbchit1基因转入受体植物烟草（Nicotiana tabacum）中，研究了转基因烟草的抗病性。主要结果如下：1、检测了毕赤酵母表达获得的几丁质酶Bbchitl对部分植物病原真菌孢子萌发和菌丝生长的抑制作用。结果表明：Bbchit1能抑制黄瓜灰霉病菌（Botrytis cinerea）、油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）、玉米小斑病菌（Bipolaris maydis）、白菜黑斑病菌（Alternaria brassicae）、柑橘绿霉（Penicillium digitatum）菌丝的生长，同时对烟草赤星病菌（Alternaria alternata）、白菜黑斑病菌（Altenaria brassicae）、黑曲霉（Aspergillus niger）、棉花黄萎病菌（Verticillium dahliae）、柑橘绿霉菌（Penicillium digitatum）孢子的萌发有抑制作用。2、将几丁质酶基因Bbchit1转入烟草中，GUS组织化学染色和Southern杂交结果表明：Bbchit1基因已整合到烟草基因组中，并稳定遗传。几丁质酶活性测定结果表明：5个T2代烟草纯合株系（Bb35、Bb49、Bb57、Bb63、Bb71）的几丁质酶活性均高于野生型对照。Western blot分析也表明，Bbchit1基因在转基因烟草中能稳定表达目标蛋白。3、对5个T2代烟草纯合株系进行了抗病性检测，结果表明：5个T2代烟草纯合株系（Bb35、Bb49、Bb57、Bb63、Bb71）与野生型对照相比，在对细菌性病害烟草青枯病的抗性上，病情指数分别降低了8.75％、53.75％、3.75％、33.75％、23.75％；在对真菌性病害烟草赤星病的抗性上，病斑面积分别减少了39.11％、35.63％、43.62％、57.22％、61.36％。转Bbchit1烟草对烟草赤星病、烟草青枯病的抗性均有不同程度的提高。