大肠癌是在全球范围内因癌肿死亡的三大肿瘤之一。手术联合放疗是目前治疗大肠癌最有效的手段，但这对于晚期大肠癌疗效差。目前治疗晚期大肠癌是以化疗为主的综合治疗，化疗方案仍是以5-FU为基础。LV/5-FU联合草酸铂(L-OHP)方案有更高的反应率。但是晚期大肠癌的生存率并无明显的改善。化疗治疗失败的主要原因是肿瘤细胞对药物的耐受和严重的毒副反应，晚期大肠癌迫切需要有新的治疗方法。 肿瘤热疗是用加热来治疗肿瘤的一种方法，使肿瘤组织温度上升到有效治疗温度(40℃-45℃)，并维持一定时间，以达到灭活肿瘤细胞，又不损伤正常组织的一种治疗方法。单纯热疗临床反应率低，目前热疗一般作为肿瘤其他治疗的一种辅助治疗手段，与某些化疗药物联合可产生互补的作用，增加化疗的敏感性，可改善、提高对于抗药性肿瘤的治疗效果。而热疗本身毒副反应少，称作是一种“绿色治疗”。 传统热疗要求温度在43℃以上，由于组织热场分布不均匀，要在深部肿瘤组织内均匀达到这个温度是困难的，而且43℃以上的热疗很容易诱导细胞产生热耐受。最近研究发现人的肿瘤细胞比鼠类细胞对亚高温(40℃-42℃)更敏感且不易产生热耐受，这为临床开展亚高温热疗提供依据。 基于以上事实，本课题把亚高温和大肠癌化疗结合起来，通过实验 浙江大学医学院硕士研究生论文和临床来研究亚高温化疗对人大肠癌的杀伤效应、作用机制以及临床可行性分析，为大肠癌治疗提供一种新的方法。实验研究 亚高温化疗对人大肠癌细胞株的杀伤效应及其诱导凋亡的研究 目的：研究亚高温＊．SC）联合化疗对人大肠癌细胞株门）的杀伤效应及其诱导凋亡，探讨亚高温化疗治疗大肠癌的机制。方法：以体外培养的大肠癌细胞（RKO）株为研究对象。采用组内分组设计，设 7个不同的加温时间组（0、30min、for、Zhr、3hr、4hr、shr），其中每一组根据加入的化疗药物不同又分为4组（未加药物组、5斗U组、L刀组、5－FU儿刀 组儿 加热和化疗同时进行，以恒温水浴热疗（41．5 C），培养48，J、时后用皿T法检测各组i邮胞抑制率门R）。细胞凋亡的检查：以流式细胞仪用 AnnexinWPI双染色法检测长时间亚高温（1．5℃Zhr）处理后 ollr、6fir、12fir、24fir、36fir、481。r不同时段的凋亡率，用先学显微镜和倒置显微镜观察细胞形态上变化。结果：41．SC亚温热作用时间小于1小时，对肚0细胞无明显细胞抑制作用O＞O．05厂 温热处理时间超过for时，单纯热疗组、L刀 组和L0 巧－FU组＊随加温时问延长而增加且各组之间存在差异＊叩．05h但5－FU组IR在各加温组之间无显著差异＊＞0．0刀；联合化疗组u0卯巧－刚）在同一加温组内比其＊最高O叩．05L RKO细胞经亚高温处理 2，1、时后在早期门刁4h）凋亡率逐步升高，但在 24hr叫8hr其凋亡率下降，而同期的细胞死亡率 2 浙江大学医学院硕十研究生论文增高。倒置显微镜和瑞氏染色显示典型的凋亡形态学改变。结论：小于1小时亚高温对人大肠癌眈 细胞无明显的细胞抑制作用；亚高温长时问 （41．5℃Zhr）可以诱导RKO细胞凋亡，出现细胞凋亡的形态学上的改变。长时间亚高温（41．SC，卜小时以上）细胞抑制作用随作用时间延长而增强；单纯亚高热细胞抑制率一般超过50丸小于单纯化疗组及热化疗组；亚高温联合化疗SFU组内细胞抑制率无明显改变；亚高温联合化疗LOHP组和5FU＋L个 化疗组有明显地增加细胞抑制作用；以亚高温与5－FU＋L－OllP寸疗联合的效率最高。临床研究 内生场区域亚高温联合化疗治疗晚期大肠癌的临舰察 目的：观察内生场区域亚高温联合化疗治疗晚期大肠癌的疗效及毒副反应。方法：21例经确诊的晚期大肠癌病人，Karnofsky评分40－80，平均52．6 ti 2．93分。用皿卜001型内生场肿瘤热疗系统对肿瘤区域进行加温，治疗频率为35．71＋0．IMHH和40．32＋0．IMHZ，并对腋下、腹腔、直肠进行测温，每周给予＝次热疗，同时给予5干U几V川 platin方案静脉化疗。每例完成卜12次。结果：经测温显示腋下平均温度为37．8oC，腹腔、直肠温度分别为40．soC、41．SC。直肠温度基本能反应腹腔温度，所有病例直肠温度能够上升到40℃以上并维持60min。根据wHO诊断标准，总的有效率（CR＋PR）71．40，其中m 达 0y；PR 71．4％；NC19．05讯 DP 9．55巩 II＄床症状缓解率达85．7巩 Kamofsky评分从治 3浙江大学医学院硕士研究生论文疗前52石土12．93分提高到80．9土14．18分（P＜0．01）。常见毒副反应：少量－中等量出汗，。。率增快。6例病人加温局部充血，4例出现水泡，互例皮下脂肪硬结，8例治疗结束后 6h出现恶心、呕吐，门例白细胞下降1—2级，上述毒副反应经对症治疗后缓解。结论：用NRL个01型内生场肿瘤热疗系统可较快提高靶区温度达到 40C叶2 t并维持for以上，符合亚高温热疗的要求；内生场区域亚高温联合化