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以从新疆特殊环境筛选的具有广谱抗性、协同增效作用的芽孢杆菌组合BCL-8(由Bacillus sp. SL-13、Bacillus sp.SL-14和Bacillus sp.SL-44组成)为研究对象,研究了BCL-8的混菌摇瓶发酵条件,检测了BCL-8的田间防病促生性能,确定了其抗菌物质的理化特性,并对单一菌产生的抗菌物质进行初步的分离,结果如下:1.通过单因素实验和正交实验,确定BCL-8最佳发酵培养基和发酵工艺。最佳发酵培养基为:玉米粉10g/L、豆粕10g/L、蜂蜜5g/L、碳酸钠2g/L、磷酸氢二钾2g/L、硫酸镁0.2 g/L、碳酸钙1g/L、硫酸锰0.1g/L、氯化铁0.1g/L、氯化钠0.5g/L、天冬氨酸0.003g/L。最佳摇瓶发酵工艺为:Bacillus sp. SL-13、Bacillus sp.SL-14和Bacillus sp.SL-44的接种比例为2:1:2,培养基初始pH值为7.0,发酵温度30℃,接种量为5%,250ml三角瓶装发酵培养基50ml,摇瓶转速为200r/min。在该条件下发酵72h后BCL-8对立枯丝核菌抑菌效价达833UI;比优化前抑菌效价提高了62%。2.利用BCL-8的发酵生物制剂对加工番茄立枯丝核病菌进行了温室盆栽、小区和大田防病促生试验。温室盆栽和小区试验结果一致反映出:BCL-8发酵液浸种后可促进加工番茄的营养生长,提高加工番茄对立枯病的防效,分别达58.62%和55.53%,明显高于三株单一菌浸种后的效果。大田试验采用先浸种、出苗后随水滴灌的施用方式,加工番茄的出苗率提高了22%,苗的鲜重、干重和株高与对照相比分别提高了63.8%、61.8%和11.6%,开花数和结果数也分别提高了51%和84%,对立枯病的防效达73%。3.对BCL-8主要抗菌物质的理化性质研究表明,主要抗菌物质与水合茚三酮反应可显紫色,双缩脲反应表现阳性,证明BCL-8产生的抗菌物质为蛋白类。该抗菌蛋白热稳定性好,在120℃处理30min后抑菌活性仍保留72%;具有较好的耐酸碱性,活性pH范围在4.0-10.0之间;能耐受乙醇、甲醇、乙酸乙酯、丙酮、乙腈、石油醚、氯仿等多种有机溶剂,紫外和可见光处理不影响其抑菌活性;蛋白酶K处理对抗菌蛋白的活性几乎没有影响;抗菌蛋白能有效抑制Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici、Rhizoctonia solani Kuhn、Phytophthora capsici、Sclerotinia sclerotiorum、Acidovorax avenae subsp. citrulli、Alternaria solani Sorauer等多种病原菌。4.三株菌Bacillus sp. SL-13、Bacillus sp.SL-14和Bacillus sp.SL-44的无菌发酵液分别通过30%-60%、40%-100%和30%-50%的硫酸铵盐析沉淀获得的各自的抑菌粗蛋白,经DEAE -Sepharose Fast Flow离子交换层析,Bacillus sp. SL-13得到3个活性峰,Bacillus sp. SL-14得到4个活性峰,Bacillus sp. SL-44得到4个活性峰;Bacillus sp. SL-13、Bacillus sp. SL-14和Bacillus sp. SL-44所得初步纯化的蛋白的浓度分别为0.1mg/ml、0.172mg/ml和0.146mg/ml;蛋白回收率分别为61.3%、63.7%和74.2%。