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背景外胚层发育不良-皮肤脆性综合征（Ectodermal Dysplasia-Skin Fragility Syndrome,EDSFS;MIM 604536）是一种罕见的单基因常染色体隐性遗传性疾病。其临床特征性改变表现为皮肤脆性增加,掌跖角化,毛发细软卷曲,少汗,甲营养不良,少数患者可出现牙齿、发育异常等症状。该病男女均可发病,出生即可发病,病情严重者可合并败血症甚至死亡。外胚层发育不良-皮肤脆性综合征是由斑菲素蛋白1（plakophilin1,PKP1）基因突变造成的。该病自1997年首次报道,至今为止国内外仅报道了 21例。PKP1基因位于1q32,由15个外显子组成,cDNA为2.7 kb。它所编码的斑菲素蛋白1,属于犰狳（armadillo）蛋白家族,是桥粒蛋白的重要组成部分。PKP1蛋白具有1a和1b两种形式,与本病相关的是主要在表皮棘细胞层、毛囊外毛根鞘、汗腺腺体上皮分布的1a亚型,共有726个氨基酸;1b主要分布在核内,可能与信号转导有关。我们确诊了一例EDSF综合征患者,并在其PKP1基因上发现了 2处新的突变。EDSF综合征属于遗传性桥粒疾病中的一种。桥粒蛋白在心脏和表皮中大量存在,在编码桥粒蛋白的基因上出现的常染色体显性或隐性突变可能导致皮肤和/或心脏异常。例如Naxos病和Carvajal综合征,其病变累及心脏和皮肤,皮肤的异常主要表现为掌跖角化和羊毛样发。这与EDSF综合征中的部分症状一致。文献中曾报道的DSP基因突变也可导致类似临床表现。因此我们推断PKP1基因突变可能引起与PKP1相互作用的蛋白表达异常,从而导致了 EDSF综合征的发病。目的1.总结1例外胚层发育不良-皮肤脆性综合征患者的病史、临床特征、体格检查及实验室检查结果;2.对患儿及其父母的PKP1基因序列进行分析检测,并回顾性分析既往文献中已报道的突变位点;3.探究PKP1基因对PKP1相关蛋白PKP2、DSP表达的影响。方法1.收集1例就诊于郑州大学第一附属医院皮肤科门诊、2月大中国男婴外胚层发育不良-皮肤脆性综合征患者的病史、体格检查、实验室检查结果。取患者皮肤组织进行病理活检HE染色检查,并使用抗Plakophilin 1抗体（ab183512）对病理切片进行免疫荧光检查,以成人正常皮肤组织为对比。通过查阅Pubmed、中国知网、万方医学网数据库检索相关文献,统计分析既往国内外已报道的EDSF综合征病例特点。2.分别取患儿及其父母的外周血提取基因组DNA样本,用PCR、Sanger测序等方法对PKP1基因进行测序,参考HGMD（Human Gene Mutation Databas,http://www.hgmd.cf.ac.uk/ac/index.php）分析变异位点致病性质,获得可疑的变异位点。3.以homo PKP1为模板PCR扩增得到目的片段,对质粒pIRES2-ZsGreen1和目的片段homo PKP1（EcoRI/XhoI）用EcoRI和XhoI进行双酶切,并将两者相连合成过表达载体。以（NM001005337）为目的序列通过体外转录合成siRNAs,作为干扰片段。在HaCAT细胞中通过过表达载体和干扰片段的转染实现PKP1表达的调控,实时荧光定量PCR检测各组PKP1 mRNA,通过Western blot法分别检测各组中PKP1、PKP2和DSP蛋白水平。最后在患者皮肤组织中用免疫组化的方法检测PKP2和DSP的表达并与正常成人对比。结果1.临床上发现患者出生时出现皮肤脆性增加、毛发细软卷曲稀疏、甲营养不良和脱落、掌纹明显,患儿父母均无类似临床表现。病理活检可见棘层增厚,角质形成细胞间隙增宽,形成小裂隙。免疫荧光显示患儿表皮中PKP1蛋白表达缺失,而对照组可见表皮中网状表达的PKP1蛋白。回顾文献共报道了 21例EDSF综合征,仅1例来自中国,临床特点为皮肤脆性增高、毛发异常、掌跖角化、甲营养不良、少汗。2.基因测序发现患儿的PKP1基因存在2处复合杂合突变:c.95-96insAC（p.T33Qfs*14）和c.1492G>T（p.E498X）。c.95-6insAC（p.T33Qfs*14）为自发突变,c.1492G>T（p.E498X）来自于患儿母亲。以上两个突变位点在HGMD专业版数据库中均未见报道。3.HaCAT细胞中正常对照组及阴性对照组中PKP1、PKP2、DSP的表达水平无明显差异,PKP1相关蛋白PKP2、DSP蛋白的表达随PKP1基因表达水平的升高而升高、降低而降低。DSP蛋白表达在患儿及正常对照者表皮中无明显差异,PKP2蛋白在正常对照者的表皮中无表达而在患儿表皮中呈弱阳性表达。结论1.临床确诊1例EDSF综合征患者,系中国报道的第2例;2.发现2处PKP1基因新突变位点:c.95-96insAC和c.1492G>T,扩大了 PKP1基因的突变谱;3.PKP1基因的表达水平对PKP1相关蛋白PKP2、DSP的表达有同向调控作用,PKP1基因突变可能引起PKP2蛋白在表皮的代偿性表达。