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旋覆花(Flos Inulae)为菊科植物旋覆花（Inula japonica Thunb.）和欧亚旋覆花（Inula Britannica L.）的干燥头状花序，《中国药典》自一九八五年版以来，均收载其作为正品药源，具有降气、消痰、行水、止呕等功效，常用于风寒咳嗽、痰饮蓄结、胸膈痞满、呕吐癔气[1]；最新药理学研究表明，旋覆花具有调节人体免疫功能[2]、保肝[3]和细胞毒[4]等作用，是一种有重大开发价值的药用植物。在二○○○版《中国药典》的旋覆花质量标准中，只有旋覆花对照药材的薄层层析鉴别方法，而无含量测定的指标和方法，迄今也无关于旋覆花化学对照品方面的文献报道。为进一步开发利用该植物，制定旋覆花药材及其制剂的质量标准势在必行，有必要以旋覆花中一种或多种专属性强、有药理活性的化学成分作为旋覆花药材的定性定量指标，建立可靠的检测方法。本课题对旋覆花中的化学成分进行提取、分离和纯化，得到了两种仅在旋覆花中存在的化合物，纯度和含量均符合《新药审批办法》对中药对照品的规定，经初步药理学实验证明，这两种化合物具有药理活性。我们以这两种化合物为双指标，采用薄层色谱法和高效液相色谱法对不同产地的旋覆花及其全草金沸草的不同部位进行了质量方法学研究，为制定旋覆花药材及制剂的质量标准提供了科学依据。<WP=5>第一部分 旋覆花化学对照品的制备目的：应用现代色谱及分析手段，对旋覆花中的化学成分进行提取、分离和结构测定。制备有效成分或指标性成分的化学对照品。方法：1 化学成分的提取：旋覆花粉末2kg，乙醇回流提取3次，每次1小时。过滤，合并提取液，浓缩后加水使之悬浮，依次分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂得各自的浸膏。2 化学成分的分离：取氯仿浸膏（50g），上硅胶柱，用正己烷∶丙酮（100∶0）到（0∶100）进行梯度洗脱，薄层监测，将相同组分的流份合并，得到5个流份，再反复上硅胶柱，以不同比例的石油醚∶乙酸乙酯∶95%乙醇为洗脱剂，从流份2分离出粗品，乙醇重结晶，得白色针状结晶（Ⅰ）；从流份3中分离出白色粉末（Ⅱ）。3 化学成分的纯度测定：测定分离出的化学成分Ⅰ和Ⅱ的熔点，紫外测定最大吸收波长，并以最大吸收波长为检测波长，RP-HPLC归一化法进行纯度测定。4 化学成分的结构测定：用IR、1HNMR、13CNMR、1H -1H COSY及MS等波谱分析方法确定这两种化合物的化学结构。结果：1 化学成分的提取：旋覆花经乙醇回流后，过滤、浓缩，以不同极性的溶剂萃取，浓缩得各部分浸膏。化学成分的分离：氯仿萃取部分经硅胶G柱层析多次<WP=6>2 分离得白色针状结晶(Ⅰ)800mg，白色粉末(Ⅱ)96mg。3 化学成分的纯度测定：熔点测定，化合物Ⅰ熔点为123.9~125.2℃，化合物Ⅱ熔点为169.0~171.8℃。Ⅰ和Ⅱ两种化合物的紫外最大吸收波长均在210nm，故以210nm作为检测波长，RP-HPLC归一化法进行纯度测定，化合物Ⅰ纯度为99.82%，化合物Ⅱ纯度为98.35%。4 化学成分的结构测定：采用IR、1HNMR、13CNMR、1H -1H COSY及MS等波谱分析方法对化合物Ⅰ和Ⅱ进行结构鉴定，并与文献报道的波谱数据比较，确定化合物Ⅰ为1-O-Acetylbritannilactone，化合物Ⅱ为Britannilactone[5]。 结论：从旋覆花中分离出两种化合物，经波谱分析方法测定结构，化合物Ⅰ为1-O-Acetylbritannilactone，化合物Ⅱ为Britannilactone，在国内均是首次从该植物中发现，其纯度达到了《新药审批办法》中的规定, 中药化学对照品纯度应在98%以上。关键词：旋覆花,柱层析,纯度,1-O-Acetylbritanni-lactone,Britannilactone