目的糖尿病结肠动力障碍是糖尿病(diabetes mellitus, DM)常见的并发症,严重影响着患者的生活质量,其发病机制尚不完全清楚,可能与自主神经、Cajal(?)间质细胞(interstitial cells of Cajal, ICC)及平滑肌病变、高血糖等多种因素异常有关。近来研究发现细胞凋亡在DM及其部分并发症的发生中起重要作用。本研究对DM大鼠进行胰岛素干预,采用实时荧光定量PCR法,检测各组平滑肌细胞中Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达,从mRNA水平研究平滑肌凋亡在糖尿病结肠动力障碍发病机制中的作用,及胰岛素、血糖对DM结肠平滑肌凋亡的影响机制。内容健康雄性SD大鼠随机分为正常组和造模组。造模组大鼠尾静脉一次性注射链脲佐菌素(streptozotocin, STZ) 40mg/kg,72h后尾静脉采血,测得血糖≥16.7mmol/L且能维持1周以上者为造模成功。造模成功的大鼠随机分为DM6周组(C组)、DM10周组(D组)、胰岛素第0周干预6周杀组(E组)、胰岛素第0周干预10周杀组(F组)、胰岛素第6周干预10周杀(G组),正常组分为正常6周组(A组)、正常10周组(B组)。E、F组大鼠自造模成功后每天皮下注射鱼精蛋白锌胰岛素16U/kg,G组大鼠造模成功后饲养6周后注射,A组、C组、E组于成模第6周处死,其余组于第10周处死。以HE染色法观察结肠组织平滑肌的变化,采用实时荧光定量PCR法对各组大鼠结肠平滑肌细胞中Bax、Bcl-2、Caspase-3基因的转录水平进行检测。方法1.实验方法：糖尿病模型的建立；石蜡包埋技术；HE染色；细胞总RNA提取；实时荧光定量PCR技术。2.统计方法：所有数据通过SPSS16.0软件进行处理,经Levene检验验证方差齐性。多组间均数比较采用单因素方差分析,多组间均数两两比较采用SNK-q检验。P<0.05被认为有统计学意义。结果1.用STZ复制糖尿病模型成功,造模后监测血糖均≥16.7mmol/l、血清胰岛素水平下降、胃肠推进率减慢,糖尿病结肠动力障碍模型复制成功。2.DM组与正常对照组比较：大鼠结肠平滑肌变薄,细胞数目减少,Bcl-2的表达减少,Bax、Caspase-3的表达增加,有统计学意义(p<0.05),并且随着DM病程的进展,改变越明显。3.胰岛素干预组较DM组大鼠结肠平滑肌增厚,细胞数目增多,Bcl-2的表达增加,Bax、Caspase-3的表达减少,有统计学意义(p<0.05),并且对DM大鼠早期进行胰岛素干预,大鼠结肠平滑肌、Bcl-2、Bax、Caspase-3的变化更明显,具有统计学意义(p<0.05)。结论1.DM组大鼠血糖升高,胰岛素水平下降,平滑肌变薄,细胞数目减少,Bcl-2表达减少,Bax、Caspase-3表达增多,且随着DM进程变化明显。2.胰岛素干预组较DM组大鼠结肠平滑肌增厚,细胞数目多,Bel-2的表达增加,Bax、Caspase-3的表达减少,并且对DM大鼠早期进行胰岛素干预,大鼠结肠平滑肌、Bcl-2、Bax、Caspase-3的变化更明显以上结果表明Bcl-2在DM组表达减少,胰岛素干预组表达增加,Bax、Caspase-3在DM组表达增加,胰岛素干预组表达减少。由于Bcl-2、Bax、Caspase-3是细胞凋亡中的关键基因,因此本实验结果说明平滑肌细胞凋亡是糖尿病结肠动力障碍发病机制之一,胰岛素具有抗凋亡的功能。