一种禽用微生态制剂的制备及其功能研究

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空肠弯曲杆菌和沙门氏菌是自然界广泛存在的人畜共患病原菌,主要引起动物和人的肠胃炎、腹泻等疾病。其中家禽是人和动物感染空肠弯曲杆菌和沙门氏菌的主要来源,由于抗生素的滥用和不合理应用,导致产生越来越多耐药的空肠弯曲杆菌和沙门氏菌,对畜禽生产、人类健康构成了严重的威胁。本研究拟筛选合适的材料包埋具有抗菌活性的乳酸菌制备微生态制剂,并对其防治空肠弯曲杆菌和沙门氏菌的效果进行研究。本研究通过筛选合适的材料包埋活性乳酸菌,采用冷冻干燥方法制备禽类微生态制剂,最佳保护剂确定为:可溶性淀粉100g/L、脱脂奶粉30g/L和玉米淀粉20g/L。得到的微生态制剂冻干后活菌数高达2.33×1010cfu/pb左右,具有胃酸耐受性强、肠溶释放性高、不易受潮的特点,在-20℃和4℃条件下能长期保存,常温下(25~30℃)能保存30天左右。为检测动物空肠弯曲杆菌和沙门氏菌的排放量,本研究建立了空肠弯曲杆菌和沙门氏菌Real-time PCR标准曲线,建立结果为:空肠弯曲杆菌重组质粒拷贝数(Copynumber)与循环阈值(Ct)之间的线性关系曲线表达式为:Ct=-3.52x+47.92,相关系数为R2=0.996。沙门氏菌重组质粒拷贝数(Copynumber)与循环阈值(Ct)之间的线性关系曲线表达式为:Ct=-3.43x+43.2,相关系数为:R2=0.994。以上两种标准曲线相似系数高,误差小。为研究微生态制剂对鸡免疫功能的影响,本研究在实验组基础日粮中添加1.0%微生态制剂,对照组不作处理,试验期间检测各组试验鸡的生长性能、肠道黏膜和免疫性能。结果表明:实验组平均体重比对照组提高了9%(P﹤0.05);25日龄,实验组法氏囊指数、胸腺指数较对照组分别提高了10.44%、36.56%(P﹤0.05),35日龄,实验组法氏囊指数和脾脏指数分别提高了40.12%和19.30%,差异显著(P﹤0.05),实验组的小肠肠壁与肠黏膜较厚,肠绒毛较长较粗,排列较整齐。以上结果表明微生态制剂对雏鸡具有增加体重,提高免疫力和促进肠道生长发育的作用。为研究微生态制剂防治肠道疾病的功能,本研究将动物分为防治组、对照组、攻毒组和治疗组。结果表明:11日龄攻毒空肠弯曲杆菌ZC8后,29日龄防治组的平均体重比对照组、攻毒组和治疗组分别高出30.83g、78.57g和14.39g,治疗组比攻毒组高64.18g;防治组的空肠弯曲杆菌的排放量呈下降趋势,攻毒组的排放量呈先下降后上升的趋势,治疗组在接受微生态制剂治疗后,排放量呈下降趋势。19日龄攻毒鼠伤寒沙门氏菌CMCC50115后,相对于对照组,防治组29日龄平均体重降低了9.0g(P>0.05),而相对于攻毒组,则提高了176.2g(P<0.01);防治组沙门氏菌排放量呈下降趋势,而攻毒组则相反,沙门氏菌排放量呈上升趋势,28日龄时排放量达到1.64×105cfu/g(P<0.01),治疗组在接受微生态制剂治疗后,沙门氏菌排放量有所减少。以上试验结果说明制备的微生态制剂对禽类空肠弯曲杆菌病和鼠伤寒沙门氏菌病具有明显的防治作用,具有增加体重,调节肠道微生态平衡的功能。
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