醋当归的炮制工艺及作用研究

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目的:本研究采用采用正交试验的方法,以确定醋当归饮片的炮制工艺;通过高效液相特征图谱法指出生当归与醋当归特征图谱差异;对醋当归饮片进行鉴定、检查和含量测定以期制定醋当归饮片质量标准草案;分别以小鼠和大鼠为研究对象,以药理实验指出当归醋制前后对凝血止血功能的影响差异。方法:1.醋当归饮片优选炮制工艺的确定选择甘肃省不同产地及批次的10批生当归作为原料,采用正交试验的方法,对当归炮制过程中辅料用量、炒制温度和炒制时间等影响因素进行研究,以鞣质、挥发油及阿魏酸含量作为指标,确定醋当归饮片的炮制工艺。2.当归醋制前后的HPLC特征图谱的制定与比较在合适的色谱条件下对10批生当归和10批醋当归进行高效液相色谱分析,对所得的谱图进行解析和比较。3.醋当归的质量标准研究对10批醋当归饮片进行外观性状、显微、薄层鉴定,以及对水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物和有效成分含量进行测试,最终制定醋当归饮片质量标准草案。4.醋当归炮制前后对凝血止血功能的研究以小鼠为研究对象,采用断尾尖法和毛细玻璃管法,测试其凝血止血时间;以大鼠为研究对象,测试其血液样本的四项凝血指标:凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原含量(FIB),研究了当归醋制前后对凝血止血功能的影响。结果:1.醋当归的炮制工艺确定为15%醋,在120℃下炒制6.5min。影响当归醋制效果的因素顺序为炒制温度>醋用量>炒制时间,炒制温度对炮制效果有显著性影响。验证试验和中试试验证明优选的工艺具有稳定性、可重复性和可操作性。2.不同批次的生当归和醋当归特征图谱相似度极高。对比生当归及醋当归特征图谱发现有峰的消失,证明了生当归醋制后有效成分发生了变化。3.对10批醋当归饮片进行了外观性状、显微、薄层鉴定,以及对水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物、阿魏酸、藁本内酯和鞣质含量进行了测试,最终制定了醋当归饮片质量标准草案。4.在较高剂量下,生当归使凝血止血时间显著延长,PT、TT、APTT值显著增加,FIB值显著减少,起到了抑制凝血的作用;而经过炮制后的醋当归则使凝血止血时间显著缩短,PT、TT、APTT值显著减少,FIB值显著增加,起到了促进凝血止血的作用。结论:1.醋当归的炮制工艺确定为15%醋,在120℃下炒制6.5min。2.高效液相色谱特征图谱可以显著区别比生当归及醋当归,证明了生当归醋制后有效成分发生了变化。3.对10批醋当归饮片进行了外观性状、显微、薄层鉴定,以及对水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物、阿魏酸、藁本内酯和鞣质含量进行了测试,最终制定了醋当归饮片质量标准草案。4.通过药理实验证明了生当归抑制凝血的作用和醋当归促进凝血止血的作用。
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