目的探讨3’-叠氮-3-脱氧胸腺核苷(3’-azido-2’,3’-dideoxythymidine, AZT)对C6胶质瘤干细胞的生长抑制作用及其可能的分子机制,为进一步应用其治疗恶性胶质瘤提供客观的实验依据。方法1.取对数生长期的C6胶质瘤细胞接种于无血清培养基,获得肿瘤干细胞。利用免疫细胞化学染色鉴定胶质瘤干细胞标志物CD 133和Nestin的表达。2.以不同浓度AZT(实验1组100umol/L、实验2组250umol/L、实验3组500umol/L、实验4组1000umol/L)作用于C6胶质瘤干细胞及胶质瘤细胞后,用改良的MTT法测定不同作用时间的药物敏感性,分别计算抑制率(IR)及半数抑制率(IC50)。3.以四组不同浓度的AZT(100umol/L、250umol/L、500umol/L、1000umol/L)作用于C6胶质瘤干细胞及胶质瘤细胞72h后,设不加药组为空白对照组,记为0umol/L,流式细胞术(FCM)检测细胞周期的变化。结果1.C6胶质瘤干细胞在无血清培养基中呈悬浮克隆球样生长,免疫细胞化学染色结果显示表达干细胞标志物CD133和Nestin;胶质瘤干细胞在含血清培养基中诱导分化后呈贴壁生长,表达星形胶质细胞标志物GFAP。2.MTT结果显示,AZT对胶质瘤干细胞及胶质瘤细胞的生长均有抑制作用,随着AZT的浓度增加及作用时间的延长,其抑制C6胶质瘤干细胞的增殖的作用逐渐增强,呈时间-剂量依赖关系。3.流式细胞仪检测结果显示：随AZT浓度的增加,胶质瘤干细胞及胶质瘤细胞的S期细胞比例增高,并伴有凋亡细胞的增多。结论1.初步证实C6胶质瘤细胞系中存在有胶质瘤干细胞,可通过无血清培养法获得胶质瘤干细胞,其可能为C6胶质瘤细胞的起源细胞。2.AZT对C6胶质瘤干细胞有生长抑制作用,其作用机制可能是通过作用于细胞的S期,干扰DNA的合成起抑制细胞生长的作用。3.与C6胶质瘤细胞进行比较,C6胶质瘤干细胞对AZT具有一定的耐药性。