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目的：CD14和TLR4(Toll-like receptor 4)是LPS(Lipopolysaccharide)信号转导途径中至关重要的受体。细胞因子信号抑制剂(suppressors of cytokine signaling，SOCS)具有负性调节LPS信号转导作用。α-黑色素细胞刺激素(α-melanocyte-stimulating hornone，α-MSH)具有很强的抗LPS功能，但是确切的作用机制还不清楚。本实验主要观察α-MSH对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞NO释放及CD14、TLR4和SOCS-3 mRNA表达的影响，进一步揭示α-MSH抗LPS的作用机制。 方法：实验采用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测LPS诱导体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞CD14、TLR4和SOCS-3 mRNA表达水平及给予α-MSH后对CD14、TLR4和SOCS-3基因表达的影响；同时留取细胞培养液上清，用Griess试剂检测LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞NO生成量的变化和α-MSH对其影响。 结果：未受刺激的正常小鼠腹腔巨噬细胞释放少量NO；LPS刺激后NO的生成量显著增加(P＜0.01)，若同时给与α-MSH后，LPS诱导NO的生成作用则完全被阻断(P＜0.01)。正常静息小鼠腹腔巨噬细胞只表达少量的CD14和TLR4 mRNA，给予LPS刺激后6h，两者表达明显增强(P＜0.01)，并且其表达量随着LPS刺激时间的增加维持在高水平，24h达到峰值，在48h CD14 mRNA的表达恢复到正常细胞的基线水平，而TLR4 mRNA的表达仍然维持在高水平。若LPS(10ug／mL)刺激的同时给予α-MSH，CD14和TLR4 mRNA的表达则明显被抑制(P＜0.05)，而且α-MSH这种效应还与其使用浓度有关，0.1nmol／Lα-MSH不影响LPS诱导的CD14和TLR4 mRNA的表达，但当α-MSH的浓度达到1、10、100nmol／L则能显著抑制CD14和TLR4 mRNA的表达(P＜0.05)，但各个浓度组之间的抑制作用没有差别(P＞0.05)。另外，在未受刺激小鼠腹腔巨噬细胞SOCS-3 mRNA有低水平的表达；10μg／mL LPS作用3h，SOCS-3 mRNA的表达明显高于正常对照组(P＜0.01)；若同时给予α-MSH，SOCS-3 mRNA的表达则显著低于LPS组(P＜0.01)。单独给予α-MSH刺激的小鼠腹腔巨噬细胞，NO释放及CD14、TLR4和SOCS-3 mRNA表达与空白对照组没有差异(P＞0.05)。 结论：α-MSH抗LPS的效应与其干扰LPS信号转导通路关键受体的表达有关。LPS在启动炎症的过程中可能通过TLR4激活SOCS-3介导的负调节机制，而α-MSH登南大学硕士学位论文。一MsH对LPs诱导小鼠腹腔巨噬细胞CD14、TLR4和SOCS一3 mRNA表达的影响可能由于抑制CD14、TLR4 mRNA的表达而下调SocS一3 mRNA的表达，说明Q一MSH的抗内毒素作用不是通过SocS蛋白介导的。a一MSH可能还通过其它途径或环节发挥抗LPS的效应。这些结果为进一步研究。一MSH在免疫调节中的作用奠定了基础。