产气荚膜梭菌病又称为“猝死症”，近年来，我国许多牛场爆发产气荚膜梭菌病，其一年四季均可发病，以夏秋两季高发。该病呈全球流行态势，目前主要利用抗生素和灭活疫苗对该病进行控制，化脓隐秘杆菌感染常引起家畜多器官的化脓性感染，主要表现为肺炎、乳房炎、皮下脓肿等，由于有效疫苗的缺乏，目前对其控制主要是抗菌药物。为有效控制A型产气荚膜梭菌和化脓隐秘杆菌病的发生与流行，本研究分别以牛源A型产气荚膜梭菌C987强毒株和病牛体内分离到的化脓隐秘杆菌菌株为基础，建立其病理感染模型，比较了铝胶佐剂、蜂胶佐剂、壳聚糖佐剂对疫苗免疫效果的影响，成功研制了不同菌悬液配比的二联灭活疫苗，并对其免疫效果进行评价。用建立的ELISA方法检测其特异性抗体，两种细菌性疫苗均显示铝胶佐剂对诱导小鼠机体产生特异性免疫应答能力强于蜂胶佐剂组和壳聚糖佐剂组，免疫攻毒保护试验结果也证实，两种细菌的铝胶佐剂疫苗对小鼠的免疫保护率都高于其他佐剂疫苗组，但其中化脓隐秘杆菌铝佐剂疫苗不能对小鼠提供100%的保护。因此通过把两种抗原进行不同比例配比，来增强化脓隐秘杆菌疫苗的免疫效果。结果显示：1：4混合比例疫苗组PLO蛋白特异性抗体水平较1：1、1：2混合比例疫苗组高，但无显著差异（P＞0.05），腹腔接种2LD50化脓隐秘杆菌菌量，1：4疫苗组可以给小鼠提供100%保护力；1：4混合比例疫苗组α毒素蛋白特异性抗体水平略低于1：1、1：2混合比例疫苗组，但差异不显著（P＞0.05）。皮下接种2LD50产气荚膜梭菌菌量，1：1、1：4疫苗组均可给小鼠提供100%保护力。综合以上考虑，最终产气荚膜梭菌及化脓隐秘杆菌二联灭活疫苗的最适抗原混合比例为1：4，免疫佐剂为铝胶佐剂。