L-Selectin靶向微泡声学特性的初步实验研究

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目的:探讨靶向脂质微泡造影剂增强淋巴结超声显像的可行性,为肿瘤转移淋巴结的超声诊断提供理论依据和实验数据。方法:1)采用静电吸附法将抗兔L-Selectin多克隆抗体结合到脂质膜微泡表面,制备靶向脂质膜微泡造影剂;荧光免疫染色实验验证抗体与脂质膜微泡的结合;流式细胞仪检测靶向微泡的结合率;B超声像图对比分析生理盐水组、普通脂质膜超声造影剂组和L-Selectin靶向脂质超声造影剂组的灰度值。2)建立兔外阴癌转移淋巴结动物模型。经外周静脉对5只实验兔分别先后注射L-Selectin靶向脂质膜超声造影剂和普通脂质膜超声造影剂,分为第一组、第二组,采用灰阶显像模式(GSIM),利用视频灰阶分析技术,来评价靶向微泡增强淋巴结超声显像的效果。结果:1)靶向脂质膜微泡的免疫荧光染色实验为阳性;抗体浓度为5ug/ml、15ug/ml、35ug/ml时靶向微泡的平均结合率分别为9.88±1.49%、29.59±2.23%、86.66±4.71%,两两比较均有统计学意义(P<0.01);生理盐水组、普通脂质膜超声造影剂(UCA)组和L-Selectin靶向脂质超声造影剂(TUCA)组B超声像图的平均灰度值分别为16.64±3.86dB、75.77±7.08dB、73.72±8.19dB。生理盐水组和UCA组二者比较有统计学意义(P<0.01),生理盐水组和TUCA组二者比较有统计学意义(P<0.01),UCA组和TUCA组二者比较无统计学意义(P>0.05)。2)5只实验兔外阴癌腹股沟转移淋巴结造影显像后,视频定量分析:第一组先注射靶向微泡造影剂后平均灰度值为97.18±8.38dB,后注射脂质造影剂后平均灰度值为83.12±2.81dB,前后比较有统计学意义(P<0.05);第二组先注射脂质造影剂后平均灰度值为80.27±3.56dB,后注射靶向造影剂后平均灰度值为92.36±9.45dB,前后比较均有统计学意义(P<0.05)。结论:采用静电吸附法可成功制备较高结合率的L-Selectin靶向微泡,结合率与加入抗体的浓度有关,同时在保持了一定的声学特性的基础上还具有良好的靶向性,可以增强兔外阴癌转移淋巴结的超声显像效果。
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