【摘 要】
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目的:（1）针对深二度烧伤使用间充质干细胞外分泌蛋白注射治疗,探究其诱导伤口再生修复作用;（2）针对大面积三度烧伤的移植需求,开发三维动态培养与精密脱细胞基质载体,构建三维复层干细胞修复补片。方法:（1）间充质干细胞培养过程中收集并纯化外分泌蛋白,体外进行外分泌蛋白对真皮成纤维细胞的功能学检测;对兔皮肤深二度烧伤进行注射治疗,评价其体内治疗效果;（2）使用RAD16-I纳米多肽凝胶为细胞提供临时支
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目的:（1）针对深二度烧伤使用间充质干细胞外分泌蛋白注射治疗,探究其诱导伤口再生修复作用;（2）针对大面积三度烧伤的移植需求,开发三维动态培养与精密脱细胞基质载体,构建三维复层干细胞修复补片。方法:（1）间充质干细胞培养过程中收集并纯化外分泌蛋白,体外进行外分泌蛋白对真皮成纤维细胞的功能学检测;对兔皮肤深二度烧伤进行注射治疗,评价其体内治疗效果;（2）使用RAD16-I纳米多肽凝胶为细胞提供临时支架,使细胞快速形成复层结构,在动态灌注培养系统中培养使细胞片结构稳定,培养后对细胞片形态细胞活性进行检测;结合反复冻融、乙醚抽提与磷脂酶A2法制备脱细胞脂肪,确定脱细胞脂肪的脱脂和脱细胞效率,分析脱细胞脂肪结构与成分的保留情况。结果:（1）外分泌蛋白在体外可有效促进成纤维细胞的迁移,同时能抑制其在炎症环境下的过度增殖和向肌成纤维细胞转化;外分泌蛋白可促进深二度烧伤伤口愈合速率,愈后组织结构更规则,伤口周边出现明显内源性干细胞;（2）复层细胞片结构稳定,其中干细胞标记物表达正常;脱细胞脂肪脱细胞效率达97.3%,脱细胞处理后具有较完整的胶原结构。结论:（1）注射外分泌蛋白可显著改善深二度皮肤烧伤的伤口质量,有效调节了自体成纤维细胞表型变化并动员了伤口周边的内源性干细胞,有效促进了伤口的再生性修复;（2）三维动态培养系统有助于体外维持细胞片活性;组合方法制备的脱细胞脂肪脱脂与脱细胞程度较高,无细胞毒性,天然结构与成分保留较为完好。
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