【摘 要】
:
目的与内容:心脏起搏细胞尤其是窦房结细胞在心脏正常节律的调控中起着重要作用。本论文旨在通过对心脏起搏细胞转分化及定向诱导分化的研究,发现潜在的促起搏细胞特化的重要转录因子和信号通路,解析亚类型心肌细胞尤其是起搏细胞的命运决定机制,最终建立体外诱导获得人心脏起搏细胞的定向分化方法。本研究的主要内容有:筛选促进人成纤维细胞向起搏细胞转分化的转录因子,解析单层心肌分化方法中雷帕霉素对亚类型心肌细胞特化的
【基金项目】
:
中国科学院战略性先导科技专项XDA01040306和XDA16020903
论文部分内容阅读
目的与内容:心脏起搏细胞尤其是窦房结细胞在心脏正常节律的调控中起着重要作用。本论文旨在通过对心脏起搏细胞转分化及定向诱导分化的研究,发现潜在的促起搏细胞特化的重要转录因子和信号通路,解析亚类型心肌细胞尤其是起搏细胞的命运决定机制,最终建立体外诱导获得人心脏起搏细胞的定向分化方法。本研究的主要内容有:筛选促进人成纤维细胞向起搏细胞转分化的转录因子,解析单层心肌分化方法中雷帕霉素对亚类型心肌细胞特化的影响及起搏细胞的成熟过程,研究维甲酸(RA)对亚类型心肌细胞尤其是起搏细胞命运决定的作用,建立经济高效且非转基因的人心脏起搏细胞的诱导分化方法。方法与结果:利用慢病毒介导的人成纤维细胞的直接重编程方法,我们发现了维甲酸受体基因RARG对起搏细胞特异基因表达的诱导作用。借助雷帕霉素诱导的心肌分化方法,同时利用免疫印迹、q PCR、流式细胞分析和电生理检测等技术,我们首先验证了雷帕霉素及其类似物对心肌分化的促进作用和共同的p53依赖的抗凋亡机制,进而发现分化晚期的心肌细胞主要是心室肌细胞,雷帕霉素不改变亚类型心肌细胞的比例。此外,我们发现单层分化中HCN4+细胞比例存在动态变化,分化早期HCN4+细胞比例较高,也可以检测到更多比例的心房和起搏样心肌细胞,且早期较晚期心肌细胞的电生理特征更不成熟。随后对维甲酸信号通路作用的研究发现RA可以提高分化过程中HCN4+细胞的比例,减少MLC2v+心室肌细胞的比例,同时增加分化晚期心房和起搏细胞的比例。另外我们发现Hedgehog信号通路的激活剂SAG可以进一步增强RA诱导的亚类型基因的表达模式,提高分化晚期心房肌细胞的比例。SAG通过促进心肌前体细胞的增殖,也可以进一步促进维生素C诱导的心室肌细胞的特化。最后,我们尝试优化了以RA信号通路为基础的心脏起搏细胞的诱导分化方法。结论:在转分化研究中筛选发现了RARG对起搏细胞特异基因表达的诱导作用。在体外诱导分化研究中证实了雷帕霉素及其类似物对单层心肌分化的促进作用,证明了雷帕霉素对亚类型心肌细胞特化没有影响;证明了起搏细胞的特化存在渐进的成熟过程;发现RA可以促进起搏细胞的命运决定,SAG可以非特异性地促进亚类型心肌细胞的分化,并据此优化了基于RA的亚类型心肌细胞的分化方法。
其他文献
作为职前教师,数学师范生的专业化发展,尤其是完整专业化知识的获得至关重要。数学变式问题构造作为数学师范生的一种数学问题提出能力,是数学师范生专业化知识的重要组成部分。对数学师范生的变式问题构造能力进行培养,不仅是数学师范生问题提出能力发展的需要,更是我国传统的数学变式教学的需要。有关数学变式问题构造的研究相当匮乏,且大多数停留在感性认识上。研究者们对“数学变式问题构造”缺乏一定的关注和认识,并没有
作为“南港学派”的奠基人,郭廷以早已在学术史上确立了崇高地位。由于研究资料的极端匮乏,目前学界尚无一本年谱、传记付梓!本文希冀在广泛征引相关档案、书信、日记的基础之上,透过对其学思生命旅程的考察,藉以再现“南港学派”如何充分利用美国基金援助,揭橥“走出去”、“请进来”的交流旗帜,迅速崛起跻身国际主流学术界的精彩故事。近史所之所以能够成立,自是其来有自。伴随一九四九年大变局面来的,不仅有国共双方的隔
最新的流行病学调查显示,原发性肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC,以下简称肝癌)是引起全球肿瘤相关性死亡的第二大病因。我国是肝癌大国,每年肝癌的病死人数占全球一半以上,是我国乃至世界公共卫生的一大难题。目前,肝癌的常规治疗手段如肝切除、肝移植和动脉栓塞化疗等已十分成熟,但是其预后改善也遇到了瓶颈期,5年总生存率仍较低。导致这一瓶颈的主要原因是肝癌的早期诊断率低和术后
在社会转型期,城市社区治理面临着各种问题和挑战,迫使城市社区治理的功能和组织体系发生改变,以适应社会转型的需要。自从民政部提出社区建设以来,我国对城市社区治理的体制与机制改革进行了许多尝试,试图实现城市社区治理结构的现代化转型。在大力推动国家治理体系和治理能力现代化的背景下,城市社区治理结构转型面临着更加严峻的任务。另一方面,随着技术治理逐渐渗透到社会治理的各个领域,技术和治理之间的张力使得城市社
教育部颁布的《高等学校学生心理健康教育指导纲要》明确提出“心理健康教育旨在提高大学生的心理素质、促进其身心健康和谐发展”。心理素质是情绪健康(心理健康的重要内容)的内源性保护因素(张大均,王鑫强,2012)。情绪调节作为促进情绪健康的关键机制(Gross&Mu(?)oz,1995;Chervonsky,Hunt,2019),已有研究发现其在心理素质与情绪健康间起中介作用,心理素质与情绪调节存在密切
结肠传输是指将消化终产物从结肠近段向远段推进的过程,而具备稳定、规律的结肠动力是排便功能正常的重要条件之一。临床上结肠传输功能异常性疾病很常见,例如炎症性肠病(IBD)和肠易激综合征(IBS)等。最新报道,IBD患者结直肠传输时间比健康人明显延长,并且结肠的运动频率与传输时间明显负相关。专家认为,IBD患者结肠运动频率高,可能是由于炎症因子刺激结肠处于高敏状态引发结肠收缩所致,但却不能产生有效的传
第一部分Rig-I通过调控造血干细胞DNA损伤应答维持造血稳态近年来,Rig-I(Retinoid acid inducible gene-I)作为重要的病毒RNA识别受体在先天性免疫领域得到了广泛而深入的研究,但是Rig-I在非病毒感染条件下的生物学功能研究甚少。课题组前期研究已经证实,在无外源病毒RNA刺激的情况下Rig-I能够参与到调控正常造血和白血病分化的过程。本研究以Rig-I+/+和R
香味是决定葡萄果实品质的重要因素之一,为此,众多学者对葡萄香气品质开展了大量研究。然而,这些研究主要针对酿酒葡萄和葡萄酒,而对鲜食葡萄研究极少。香味感知是一个极其复杂的过程,其不仅受品种、发育时期和栽培措施等因素调控香气物质浓度的影响,还受化合物间的相互作用和食用过程等因素的调控。为此,本研究利用顶空固相微萃取技术从品种、发育时期和环境因素(生长调节剂、根域限制栽培技术)方面研究了果实内源香气物质
背景:在缺血性卒中的慢性期,血管新生为缺血脑组织提供充足的氧气和营养物质,为神经再生提供必要的因子及解剖支持,从而对卒中症状的改善起着非常重要的作用。实验证明了微小RNA-126在胚胎发育时期,通过抑制PIK3R2及SPRED1的表达,激活VEGF信号通路,参与了血管新生的调控,但是其在缺血性卒中中的功能还不清楚。我们假设在脑缺血小鼠的脑内过表达微小RNA-126可以促进卒中小鼠神经功能恢复。应用
自医学放射影像设备问世以来,医学影像在现代医疗活动中正逐渐扮演着举足轻重的地位。对于大多数疾病,确定其相关医学影像中疑似病灶区域类型并建立相应后续治疗方案是提高患者生存率,延长生存期的关键。计算机辅助诊断系统是诊断医学影像中各种早期病变的一种有效手段。通过结合医学影像处理与人工智能技术,该系统能有效提供给医生关于医学影像的“第二诊断意见”,从而大幅度降低医生的阅片工作量,并提高诊断准确率与效率。有