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目的:原发性肝癌是人类常见的恶性肿瘤之一,严重的危害我国人民的生命和健康。研究表明酪氨酸蛋白激酶信号转导系统在肿瘤发生发展中起重要作用,在肝癌细胞的信号转导链中涉及多种信号转导途径,起主要作用的有促进细胞增殖并调节基因转录的Ras/Raf/MAPK途径和调节效应基因转录的JAK-STAT途径。中药斑蝥具有抗肿瘤活性,对宫颈癌、鼻咽癌、皮肤癌、骨髓瘤、白血病、卵巢癌及肝癌细胞等有抑制作用。本研究利用斑蝥活性成分斑蝥酸钠维生素B6(Sodium Cantharidinate and Vitamin B6,SCVB6)作用于肝癌SMMC-7721细胞株,以MEK途径特异性抑制剂PD98059及U0126作为对照,观察SCVB6对肝癌细胞的MAPK、JAK-STAT信号通路的影响。方法:1 MTT法检测SCVB6、SCVB6+PD98059、SCVB6+U0126对肝癌SMMC-7721细胞株增殖的影响;2 RT-PCR法检测SCVB6、SCVB6+PD98059、SCVB6+U0126对肝癌SMMC-7721细胞erk、stat3、stat5、c-jun mRNA的影响;3 Western blotting法检测SCVB6、SCVB6+PD98059、SCVB6+U0126对肝癌SMMC-7721细胞ERK、STAT3、STAT5、P-ERK、P-STAT3、P-STAT5、C-JUN蛋白表达的影响;4激光共聚焦显微镜检测SCVB6、SCVB6+PD98059、SCVB6+U0126对肝癌SMMC-7721细胞ERK、STAT3、STAT5、P-ERK、P-STAT3、P-STAT5、C-JUN蛋白表达的影响。结果:1 MTT结果示:SCVB6能够抑制SMMC-7721细胞增殖,呈浓度-时间依赖性。PD98059或U0126与SCVB6联合应用48h后对细胞增殖的抑制率升高,与单独应用SCVB6 48h相比差异有显著性(P <0.05)。2 RT-PCR结果示:SCVB6作用于肝癌SMMC-7721细胞48h后,erk、stat3、stat5、c-jun mRNA表达量均有明显下降,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。SCVB6 + PD98059、SCVB6 + U0126组作用于SMMC-7721细胞48h后,erk、stat3、stat5、c-jun mRNA的表达量比对照组降低,差异有显著性(P<0.05)。与SCVB6组相比较,SCVB6+PD98059、SCVB6+U0126组erk、stat3、stat5 mRNA的表达量降低,差异有显著性(P<0.05)。3 Western blotting结果示: SCVB6作用于肝癌SMMC-7721细胞48h后,ERK、STAT3、STAT5、P-ERK、P-STAT3、P-STAT5、C-JUN蛋白表达量均有下降,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。SCVB6+PD98059、SCVB6+U0126作用于SMMC-7721细胞48h后,ERK、STAT3、STAT5、P-ERK、P-STAT3、P-STAT5、C-JUN蛋白表达量和对照组比较显著降低(P<0.05)。与SCVB6组相比较,SCVB6+PD98059作用于SMMC-7721细胞48h后蛋白STAT3、P-STAT3、C-JUN表达量均有下降,差异有显著性(P<0.05)。SCVB6+U0126组与SCVB6组相比较ERK、P-ERK、P-STAT3、P-STAT5、C-JUN蛋白表达量下降,差异有显著性(P<0.05)。4激光共聚焦结果示:SCVB6作用于SMMC-7721细胞48h后,ERK、STAT3、STAT5、P-ERK、P-STAT3、P-STAT5、C-JUN抗体的荧光强度均较对照组降低,其中P-ERK、P-STAT3、P-STAT5、C-JUN更明显。SCVB6+PD98059、SCVB6+U0126组ERK、STAT3、STAT5、P-ERK、P-STAT3、P-STAT5、C-JUN抗体的荧光强度均显著降低。结论:1 SCVB6能下调肝癌细胞erk、stat3、stat5、c-jun mRNA表达水平,降低ERK、STAT3、STAT5蛋白激酶的磷酸化水平及下游信号C-JUN的表达,从基因转录和蛋白活化两个水平抑制MAPK、JAK-STAT通路及其下游信号的传递,从而抑制肿瘤细胞的增殖。2 SCVB6能增强PD98059、U0126对肝癌细胞增殖的抑制,起增效作用。