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【目的】
研究PHC3对人上皮性卵巢癌A2780细胞增殖、迁移、侵袭、周期和凋亡的影响,以期在细胞水平研究PHC3在上皮性卵巢癌中可能发挥的作用。
【方法】
1.利用实时荧光定量PCR(qPCR)分别检测PHC3在正常卵巢上皮IOSE80细胞和上皮性卵巢癌A2780细胞中的表达水平。
2.通过瞬时转染技术在上皮性卵巢癌A2780细胞中转染PHC3siRNA,首先通过qPCR验证PHC3基因的干扰效果,最后分别检测干扰PHC3的表达对A2780细胞增殖、迁移、侵袭、周期和凋亡的影响。
【结果】
1.qPCR结果显示:与正常卵巢上皮IOSE80细胞(1.003±0.102)相比,PHC3在上皮性卵巢癌A2780细胞(1.283±0.095)中表达增高,差异有统计学意义(P<0.05)。
2.CCK8增殖实验结果显示:与阴性对照组[0.430±0.006(24h);0.573±0.018(48h);0.834±0.068(72h);1.235±0.085(96h)]相比,PHC3干扰组[0.391±0.022(24h);0.476±0.015(48h);0.596±0.044(72h);0.868±0.015(96h)]抑制上皮性卵巢癌A2780细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.001)。
3.克隆形成实验结果显示:与阴性对照组(155±9.17)相比,PHC3干扰组(46±2.00)抑制上皮性卵巢癌A2780细胞克隆数形成,差异有统计学意义(P<0.001)。
4.Transwell迁移实验结果显示:与阴性对照组(213±38)相比,PHC3干扰组(121±28)抑制上皮性卵巢癌A2780细胞迁移,差异有统计学意义(P<0.05)。
5.Transwell侵袭实验结果显示:与阴性对照组(148±15)相比,PHC3干扰组(90±12)抑制上皮性卵巢癌A2780细胞侵袭,差异有统计学意义(P<0.01)。
6.细胞周期实验结果显示:与阴性对照组[47.76±0.88(G1期);35.77±1.45(S期)]相比,PHC3干扰组[56.96±0.18(G1期);24.50±0.41(S期)]使上皮性卵巢癌A2780细胞周期处于G1期的细胞比例增高,处于S期的细胞比例降低,差异有统计学意义(P<0.001)。
7.细胞凋亡实验结果显示:与阴性对照组(9.70±1.57)相比,PHC3干扰组(13.33±0.75)促进上皮性卵巢癌A2780细胞凋亡,差异有统计学意义(P<0.05)。
【结论】
PHC3在上皮性卵巢癌A2780细胞中高表达,它可以促进上皮性卵巢癌A2780细胞增殖、迁移和侵袭,促进上皮性卵巢癌A2780细胞周期进入S期,并抑制上皮性卵巢癌A2780细胞凋亡,因此PHC3在上皮性卵巢癌中可能发挥促癌因子的作用。
研究PHC3对人上皮性卵巢癌A2780细胞增殖、迁移、侵袭、周期和凋亡的影响,以期在细胞水平研究PHC3在上皮性卵巢癌中可能发挥的作用。
【方法】
1.利用实时荧光定量PCR(qPCR)分别检测PHC3在正常卵巢上皮IOSE80细胞和上皮性卵巢癌A2780细胞中的表达水平。
2.通过瞬时转染技术在上皮性卵巢癌A2780细胞中转染PHC3siRNA,首先通过qPCR验证PHC3基因的干扰效果,最后分别检测干扰PHC3的表达对A2780细胞增殖、迁移、侵袭、周期和凋亡的影响。
【结果】
1.qPCR结果显示:与正常卵巢上皮IOSE80细胞(1.003±0.102)相比,PHC3在上皮性卵巢癌A2780细胞(1.283±0.095)中表达增高,差异有统计学意义(P<0.05)。
2.CCK8增殖实验结果显示:与阴性对照组[0.430±0.006(24h);0.573±0.018(48h);0.834±0.068(72h);1.235±0.085(96h)]相比,PHC3干扰组[0.391±0.022(24h);0.476±0.015(48h);0.596±0.044(72h);0.868±0.015(96h)]抑制上皮性卵巢癌A2780细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.001)。
3.克隆形成实验结果显示:与阴性对照组(155±9.17)相比,PHC3干扰组(46±2.00)抑制上皮性卵巢癌A2780细胞克隆数形成,差异有统计学意义(P<0.001)。
4.Transwell迁移实验结果显示:与阴性对照组(213±38)相比,PHC3干扰组(121±28)抑制上皮性卵巢癌A2780细胞迁移,差异有统计学意义(P<0.05)。
5.Transwell侵袭实验结果显示:与阴性对照组(148±15)相比,PHC3干扰组(90±12)抑制上皮性卵巢癌A2780细胞侵袭,差异有统计学意义(P<0.01)。
6.细胞周期实验结果显示:与阴性对照组[47.76±0.88(G1期);35.77±1.45(S期)]相比,PHC3干扰组[56.96±0.18(G1期);24.50±0.41(S期)]使上皮性卵巢癌A2780细胞周期处于G1期的细胞比例增高,处于S期的细胞比例降低,差异有统计学意义(P<0.001)。
7.细胞凋亡实验结果显示:与阴性对照组(9.70±1.57)相比,PHC3干扰组(13.33±0.75)促进上皮性卵巢癌A2780细胞凋亡,差异有统计学意义(P<0.05)。
【结论】
PHC3在上皮性卵巢癌A2780细胞中高表达,它可以促进上皮性卵巢癌A2780细胞增殖、迁移和侵袭,促进上皮性卵巢癌A2780细胞周期进入S期,并抑制上皮性卵巢癌A2780细胞凋亡,因此PHC3在上皮性卵巢癌中可能发挥促癌因子的作用。