目的:热痹清片是含有制马钱子的复方中成药,用于治疗类风湿性关节炎。制马钱子中的士的宁与马钱子碱既是热痹清片的有效成分,又是毒性成分。本课题研究大鼠灌胃给予热痹清片后,士的宁与马钱子碱的血药浓度检测方法,及体内药物动力学规律与特征,为该药的制剂与质量控制、合理与安全地在临床上应用提供科学依据,也为开展含马钱子的复方中药制剂的药物动力学研究提供研究方法与思路。　　方法:中药有效成分含量极低,其在血液、血浆或组织液中的纯化、富集与含量测定是制约中药制剂,开展药物动力学研究的难题。本课题首先对生物样品处理方法进行研究:用HPLC-UV法进行检测分析,比较液-液萃取法、硅藻土柱法、固相萃取(SPE)柱法等方法对士的宁和马钱子碱的纯化、富集效果,确立可行的处理方法,并进一步对各纯化富集操作条件进行优化。　　生物样品检测方法研究:研究高效毛细管电泳法、荧光分光光度法、高效液相-荧光检测法、高效液相-紫外检测法对含士的宁和马钱子碱的生物样品的可行性与灵敏性,确立可行的检测方法。并对所确立的检测方法进行线性关系、专属性、回收率、精密度、稳定性等方法学研究。　　热痹清片中士的宁与马钱子碱在大鼠体内的药动学研究:大鼠,雌雄各半,随机分组,禁食12h,自由饮水;采用单剂量灌胃给药方式,给药剂量为2.53g·kg-1,并于给药后0.05h,0.08h,0.17h,0.33h,0.5h,0.75h,1h,2h,4h,6h,9h时摘眼球取血2ml,每个时间点五只大鼠,将样品进行纯化富集,测定士的宁和马钱子碱的血药浓度,经药动学软件DAS处理,分别建立士的宁和马钱子碱的动力学模型,求算其药代动力学参数。　　结果:生物样品处理方法研究结果:实验表明,混合阳离子型SPE柱(PCX-SPE)处理的生物样品中士的宁和马钱子碱的回收率均达到70％以上,确立采用0.8%三氯乙酸溶液进行血液的前处理、活化SPE柱和淋洗杂质,5%氨水-甲醇(10:90)洗脱进行生物样品的制备。　　生物样品检测方法研究结果:纯化处理后的样品经高效毛细管电泳法检测,进样量条件为0.5Psi、5.0s,未检测出生物样品中士的宁和马钱子碱;对荧光分光光度法和高效液相-荧光检测法进行研究,结果未能建立专属性的荧光色谱检测法。高效液相-紫外检测法检测到了士的宁和马钱子碱,分离度大于1.5,达到药典要求且峰形良好,确定采用HPLC-UV法进行样品检测。　　方法学研究结果:士的宁的线性范围为0.44～3.05μg·ml-1,马钱子碱的线性范围为0.82～5.74μg·ml-1;血液中内源性物质及士的宁和马钱子碱衍生物不干扰士的宁和马钱子碱的测定;在士的宁浓度分别为0.87μg·ml-1、1.42μg·ml-1、2.18μg·ml-1时,其绝对回收率分别为78.0%、80.1%、78.8%(n=5),RSD为2.57%、5.70%、6.22%;在马钱子碱浓度分别为1.64μg·ml-1、2.66μg·ml-1、4.1μg·ml-1时,其绝对回收率分别为80.5%、83.0%、84.1%(n=5),RSD为4.57%、6.12%、4.05%,两者的日内与日间精密度的RSD均小于15%,生物样品分别在室温中放置8h和在3℃冰箱中放置74h后的稳定性良好,RSD均小于15%,符合生物样品分析要求。　　药动学研究结果:应用药代动力学软件DAS分别处理士的宁和马钱子碱的药时数据,结果士的宁和马钱子碱在大鼠体内的药物动力学模型均符合体内二室模型,士的宁的t1/2α为0.45h,t1/2β为17.085h,V为0.784L·kg-1,Cl为0.006L·h-1·kg-1,AUC为12.974mg·L-1*h-1,k10为0.008h-1,k12为0.22h-1,k21为1.353h-1,ka为95.731h-1,k1/2ka为0.007h,tmax为0.17h,Cmax为2.02mg·L-1;马钱子碱的t1/2α为0.211h,t1/2β为35.152h,V为0.559L·kg-1,Cl为0.011L·h-1·kg-1,AUC为22.043mg·L-1*h-1,k10为0.02h-1,k12为0.241h-1,k21为3.042h-1,ka为49.978h-1,k1/2ka为0.014h,tmax为0.17h,Cmax为2.94mg·L-1。　　结论:PCX-SPE作为生物样品处理方法时能够改善士的宁和马钱子碱的富集、提纯,使萃取回收率提高。　　高效液相-紫外色谱法专属性强、能准确地对生物样品中士的宁和马钱子碱进行定量分析。　　经过药动学实验,得到大鼠口服热痹清片后士的宁和马钱子碱体内药动学参数,两者符合二室模型,吸收分布较快,消除速度减慢。