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目的:胰腺癌作为一种消化道恶性肿瘤,其五年生存率不足5%。胰腺癌早期或术后发生的邻近及远处器官转移是导致其手术切除率低及临床高死亡率的主要原因,所以研究调控胰腺癌发展及侵袭转移的关键分子,对胰腺癌临床治疗及预后有重大意义。P2X7受体蛋白作为一种以ATP为配体的门控型离子通道受体,其在多种肿瘤组织中高表达,并参与了肿瘤的发生、发展及凋亡等多种病理生理过程。我们本次的实验主要探索P2X7受体蛋白在胰腺癌中的表达及临床意义,以及其调节胰腺癌侵袭迁移的潜在机制。方法:1.应用Western blot实验和qRT-PCR实验分析人胰腺癌组织、癌旁组织标本中P2X7受体蛋白的表达情况,并应用免疫组织化学方法分析人胰腺癌组织中P2X7受体蛋白的表达与胰腺癌临床病理特点之间的关系。2.选取正常胰腺细胞系HPDE6-C7及常见胰腺癌细胞系SW1990、PANC-1、BxPC-3、MiaPaCa-2及PANC02.03,应用Western blot实验和细胞免疫荧光实验检测上述细胞系中P2X7受体蛋白的表达情况;并筛选出P2X7受体蛋白高表达的胰腺癌细胞株,分别设置对照组,P2X7受体激动剂BzATP(2000μM)处理组,P2X7 受体激动剂 BzATP(200μM)+抑制剂 A740003(20μM)处理组,应用 Transwell实验、细胞划痕实验检测上述处理后所选细胞株侵袭迁移能力变化。3.为进一步探索P2X7受体蛋白对胰腺癌细胞侵袭迁移的潜在机制,选取P2X7受体蛋白高表达细胞株,分别设置对照组,P2X7受体激动剂BzATP(200μM)处理组,P2X7受体激动剂BzATP(2000μM)+抑制剂A740003(20μM)处理组,应用Western blot实验检测上述处理后该细胞株中侵袭迁移相关蛋白MMP2、MMP9、E-cadherin、Vimentin的表达情况和对AKT信号通路关键蛋白AKT蛋白磷酸化激活的影响。结果:1.Western blot实验和qRT-PCR实验结果显示P2X7受体蛋白在胰腺癌组织中高表达,在癌旁组织中低表达;且P2X7受体蛋白表达水平与胰腺癌的临床肿瘤分化程度(低分化)及淋巴结转移呈显著性相关(P<0.05)。2.Western blot实验和细胞免疫荧光实验结果显示P2X7受体在胰腺癌细胞中高表达,并且选取P2X7受体高表达的PANC-1细胞进行Transwell实验、细胞划痕实验结果显示,P2X7受体蛋白的激活可促进PANC-1细胞的侵袭迁移。3.免疫印迹实验结果显示,PANC-1细胞中P2X7受体蛋白激活后,可下调E-cadherin蛋白表达,上调Vimentin、MMP2、MMP9蛋白的表达,且使pAKT蛋白的表达升高且呈时间依赖性。结论:1.P2X7受体蛋白在胰腺癌中高表达,并与胰腺癌的分化程度及淋巴结转移显著相关。2.P2X7受体蛋可能通过AKT信号通路调节E-cadherin、Vimentin、MMP2、MMP9蛋白的表达进而影响胰腺癌的侵袭及迁移。意义:1.研究了 P2X7受体蛋白与胰腺癌临床病理特征之间的关系,为进一步探索P2X7受体蛋白在胰腺癌发展中的作用提供相关的实验理论依据。2.P2X7受体蛋白可介导胰腺癌的侵袭及迁移,为胰腺癌的分子靶向治疗研究提供了一个潜在的的靶点。