二维液相色谱是近年发展起来的一种新型色谱分离技术，与一维色谱相比能显著提高色谱峰容量和选择性，可以解决单一色谱分离模式难以解决的分离分析问题，已被广泛用于中药等复杂样品体系的分离分析中。栀子豉汤出自张仲景的《伤寒论》，由栀子和淡豆豉两味药材组成，用于治疗更年期抑郁症，失眠，神经衰弱等病症，在临床上具有广阔的开发利用前景。本论文以栀子豉汤为研究对象，开展了离线模式二维液相色谱系统的理论研究和实际应用，分别应用于栀子、淡豆豉两味药材和栀子豉汤全方的分析，并结合质谱分析方法，对栀子豉汤中成分做了更深入的研究。本论文共分五章，主要内容包括：第一章介绍了选题背景和意义。主要介绍了二维液相色谱的原理、评价指标和分类，综述了二维液相色谱在中药成分分离分析中的应用，阐述了发展二维液相色谱对中药复杂体系分离分析的重要意义。第二章建立了离线反相-亲水二维液相色谱的正交性评价体系。选取相同规格的反相C18柱和亲水HILIC柱，分别构建二维反相/亲水系统和二维亲水/反相系统，两者的正交度分别为69.92%和46.82%，峰容量分别为7303和4551。结果表明二维反相/亲水系统的正交度和峰容量均高于二维亲水/反相系统。因此选择二维反相/亲水系统作为分析栀子豉汤中单味药材和全方的方法。第三章构建了栀子的离线反相/亲水二维液相色谱分离体系。采用半制备C18柱和分析型HILIC柱分别作为两维色谱柱，以提高整个系统的峰容量和第二维分析的灵敏度。通过此系统共从栀子中分离出896个色谱峰。同时结合质谱法对16种环烯醚萜苷类和栀子黄色素类成分做了初步的鉴定。第四章构建了淡豆豉的中心切割模式离线反相/亲水二维液相色谱分离体系。针对淡豆豉药材质量不稳定性的问题，采用中心切割模式对淡豆豉中的不同极性组分进行选择性分离。选取含有极性键合基团的XAqua C18柱和XAmide柱分别作为两维色谱柱。通过此系统从淡豆豉强极性成分中分离出136个色谱峰，从弱极性成分中分离出198个色谱峰。同时结合质谱法对11种大豆异黄酮类化合物进行了鉴定。第五章建立了栀子豉汤全方的离线反相/亲水二维液相色谱分离体系。采用含有极性键合基团的XAqua C18柱和XAmide柱分别作为两维色谱柱。通过此系统共从栀子豉汤全方中分离出441个色谱峰。通过二维液相色谱与质谱联用的方法对全方的成分进行了全面的表征，并与栀子、淡豆豉单味药材的二维液相分析结果相比较，对栀子豉汤方剂与单味药材之间有效成分的差异及可能存在的变化机理进行初步推测。