副溶血弧菌噬菌体与其宿主动态关系的研究

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为了将副溶血弧菌噬菌体更好的用于副溶血弧菌的生物防治,为水产经济动物病害的防控提供一种新技术,本文在本实验室工作的基础上,从自然环境中分离、筛选了5株副溶血弧菌及其噬菌体。研究了以紫外线作为诱导剂对副溶血弧菌噬菌体裂解范围的影响。研究了副溶血弧菌及副溶血弧菌噬菌体在无菌人工养殖海水、养殖海水和凡纳滨对虾血液当中的动态关系及这种关系的稳定性。最后研究了副溶血弧菌在一些抗菌物质与副溶血弧菌噬菌体联合作用的条件下的数量变化情况。本研究为噬菌体的实际应用提供了理论基础。具体研究结果如下:1、从自然环境中分离得到5株副溶血弧菌(V2、V3、V4、V5、V6)及其噬菌体(P2、P3、P4、P5、P6)。与本实验室分离、鉴定保存的一株副溶血弧菌(V1)及其噬菌体(P6)一起进行交叉反应,并将各株副溶血弧菌噬菌体分别与非宿主的副溶血弧菌进行裂解反应,用双平板法测定。将各株副溶血弧菌噬菌体经紫外线诱导不同时间后分别与其余的副溶血弧菌进行裂解反应,用双平板法测定。结果表明,各副溶血弧菌噬菌体均不能与非宿主菌产生裂解反应。经过紫外线的诱导后,副溶血弧菌噬菌体的裂解范围有所扩大,P1噬菌体经过诱导后可以裂解V1、V2、V3三株副溶血弧菌,P2噬菌体经过诱导后可以裂解V2、V3两株副溶血弧菌,P3噬菌体经过诱导后可以裂解V1、V2、V3三株副溶血弧菌,P5噬菌体经过诱导后可以裂解V5、V6两株副溶血弧菌,P6噬菌体经过诱导后可以裂解V4、V6两株副溶血弧菌。2、将不同浓度的副溶血弧菌噬菌体与一定浓度的副溶血弧菌分别加入到无菌人工养殖海水与养殖海水中。结果表明,副溶血弧菌噬菌体及其宿主菌在这两种条件下均能够达到一种动态平衡关系,加入高浓度的副溶血弧菌噬菌体在与副溶血弧菌达到动态平衡时能使副溶血弧菌下降到较低的浓度水平。并且这种动态平衡的关系可以维持一段较长的时间。3、在无菌人工养殖海水与养殖海水中,当副溶血弧菌噬菌体与宿主菌达到动态平衡后,再次分别加入一定浓度的副溶血弧菌或一定浓度的副溶血弧菌噬菌体,结果表明,高浓度的副溶血弧菌噬菌体与副溶血弧菌建立的这种平衡关系的稳定性较好,能耐受副溶血弧菌的再次冲击,使剐溶血弧菌在较短的时间内大幅度下降。在无菌人工养殖海水中,副溶血弧菌噬菌体的浓度高于副溶血弧菌的浓度1到2个数量级所建立的这种动态平衡的稳定性较好,而在养殖海水中,副溶血弧菌噬菌体的浓度高于副溶血弧菌的浓度1个数量级或与副溶血弧菌的浓度处于同一数量级所建立的这种动态平衡的稳定性较好。4、将不同浓度的副溶血弧菌噬菌体与一定浓度的副溶血弧菌加入到凡纳滨对虾养殖海水中,研究副溶血弧菌及其噬菌体在凡纳滨对虾血液中的动态关系。结果表明,在各实验组凡纳滨对虾血液中均检测出副溶血弧菌噬菌体的存在,并能维持一段较长的时间,高浓度副溶血弧菌噬菌体实验组水体中的凡纳滨对虾血液中副溶血弧菌噬菌体的浓度要高于低浓度实验组,利用涂布平板法在凡纳滨对虾血液中未检测到副溶血弧菌的存在。当再次在水体中加入一定浓度的副溶血弧菌后,凡纳滨对虾血液中副溶血弧菌噬菌体的变化不大,当再次在水体中加入一定浓度的副溶血弧菌噬菌体后,凡纳滨对虾血液中的副溶血弧菌噬菌体的浓度有所上升,并维持一段时间。5、在无菌人工养殖海水中,加入副溶血弧菌,使水体中副溶血弧菌终浓度达到106数量级,然后分别将金银花、黄芩、鱼腥草、半边莲煎剂和大蒜液与一定浓度的副溶血弧菌噬菌体联合加入到水体中。结果表明,以大蒜液与副溶血弧菌噬菌体联合作用于副溶血弧菌的效果最好,能使水体中初始副溶血弧菌浓度106数量级在实验开始后第1天时下降到104数量级,而在实验第3天后副溶血弧菌的浓度下降到102数量级,然后与副溶血弧菌噬菌体达到动态平衡。
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