蛋白质和核酸与小分子的相互作用及其分析应用的研究

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蛋白质和核酸是生命科学与生物化学中两类最重要的生物大分子。蛋白质担负着各种生理功能,从整体上维持生物体新陈代谢活动的进行,是生物性状的直接表达者,而核酸是揭示生命遗传与变异的主要物质。因此,深入研究小分子物质与蛋白质和核酸的作用机理,特别是建立蛋白质以及核酸快速、简便的分析方法,对分子水平上阐明生命的奥秘等方面具有重要的意义,是当前生物分析化学研究的前沿和热点。 本论文以分析化学,生物化学与生物物理为研究背景,利用荧光技术、光散射技术、吸收光谱技术、圆二色谱技术、小角散射技术、核磁共振技术、扫描电镜和压电传感器等手段研究了小分子与蛋白质、核酸的作用机理,建立了蛋白质以及核酸快速、准确、简便、灵敏而选择性的分析方法。论文共分五个部分。 论文的第一部分评述了蛋白质和核酸发光探针的基本原理、研究进展和发展趋势,以及小分子物质与生物大分子相互作用的研究手段等,共引用文献192篇。 论文的第二部分中,在两个激发波长下,研究了morin-Al3+-表面活性剂-蛋白质体系的荧光增强效应。研究发现在阴离子表面活性剂SDBS和阳离子表面活性剂CTAB存在下蛋白质都能增强morin-Al3+的荧光。同时实验了morin-Al3+-SDBS-BSA和morin-Al3+-CTAB-BSA体系的荧光增强效应的最佳实验条件,建立了BSA的浓度与体系的荧光强度之间的线性方程,并将该效应应用于蛋白质的检测中。在morin-Al3+-SDBS-蛋白质体系中,检测BSA、HSA和EA的线性范围分别为0.010-13.0μg/mL、0.050-12.0μg/mL、0.040-12.0μg/mL(420nm激发)和0.0070-12.0μg/mL、0.0080-15.0μg/mL、0.020-15.0μg/mL(280nm激发),检出限分别为5.0ng/mL、16ng/mL、18ng/mL(420nm激发)和2.0ng/mL、5.6ng/mL、12ng/mL(280nm激发);在morin-Al3+-CTAB-蛋白质体系中,420nm和280nm激发波长下,检测BSA、HSA和EA的线性范围分别为0.0050-20.0μg/mL、0.020-15.0μg/mL、0.040-13.0μg/mL和0.0030-20.0μg/mL、0.0060-20.0μg/mL、0.010-18.0μg/mL,检出限分别为2.6ng/mL、14ng/mL、16ng/mL和0.70ng/mL、4.1ng/mL、5.6ng/mL,显然,280nm激发下的灵敏度较
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