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癫痫是一种常见的慢性神经系统疾病,可以影响所有年龄段的人群,癫痫的慢性病程及反复发作带来了巨大的社会负担。在癫痫发病机制的研究中,目前越来越多的研究认为免疫,尤其是细胞因子的改变在癫痫的发生发展中起到了重要的作用。我们用ELISA的方法对原发性癫痫患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌的TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-10、IL-4、IL-6、IL-17A、IL-23以及IL-1β进行测定,探讨原发性癫痫患者PBMC分泌的细胞因子与癫痫严重程度的相关性。此外,CD4+CD25high调节性T细胞对细胞因子具有调节作用,可抑制促炎介质,因此我们采用流式细胞术对原发性癫痫患者外周血CD4+CD25highT细胞比例进行测定,探讨其与癫痫严重程度的关系,及对相关细胞因子的作用。以期探寻原发性癫痫患者的免疫改变与癫痫严重程度的相关性。第一部分原发性癫痫患者外周血单个核细胞分泌的细胞因子与癫痫严重程度的相关性研究目的：研究原发性癫痫患者外周血PBMC分泌的Th1类、Th2类、Th17相关细胞因子及IL-6、IL-1β浓度的改变,及其与癫痫严重程度的相关性。方法：应用ELISA的方法测定49例原发性癫痫患者及30例健康对照外周血PBMC分泌的细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-10、IL-4、IL-6、IL-17A、IL-23、IL-1β的浓度。对癫痫患者使用NHS3量表及VA量表评估癫痫严重程度。结果：难治性癫痫患者及普通癫痫患者PBMC分泌的TNF-α、IL-6、IL-17A浓度均较健康对照组明显升高(P<0.05),并且在难治性癫痫患者中增高程度更加显著。难治性癫痫患者外周血PBMC培养上清液中IFN-γ的浓度较健康对照组显著升高(P=O.011),在普通癫痫患者中也有升高,但差别无统计学意义。癫痫患者IL-2、IL-1β、IL-23浓度较健康对照有增高趋势,IL-4、IL-10有下降趋势,但差异均无统计学意义。多因素回归分析示癫痫严重程度NHS3评分与IL-10浓度呈负相关(P=0.021),VA评分与TNF-α浓度呈正相关(P=0.037)。结论：原发性癫痫患者外周血PBMC分泌的Th1类细胞因子升高,其中以TNF-α及IFN-γ最为显著；IL-17A及IL-6水平也升高。并在难治性癫痫患者中增高程度更加明显。癫痫严重程度与IL-10浓度呈负相关,与TNF-α呈正相关。第二部分原发性癫痫患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞与癫痫严重程度关系的研究目的：探讨原发性癫痫患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞的改变,及其与癫痫严重程度的关系；初步探讨提高癫痫患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞后,相关细胞因子的改变。方法：运用流式细胞术对27例健康对照及40例原发性癫痫患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞进行测定；分离原发性癫痫患者外周血PBMC,给予促红细胞生成素(5ng/ml)或未给予干预,同时培养后,观察干预组及未干预组CD4+CD25high调节性T细胞及培养上清液TNF-α、IFN-γ水平的变化。结果：原发性癫痫患者外周血CD4+CD25highT细胞的百分率为0.06±0.05%,较健康对照(0.57±0.74%)显著降低(P=0.006)。原发性癫痫患者外周血PBMC培养72h后CD4+CD25high调节性T细胞亦显著下降(癫痫组：0.53±0.51%,对照组：0.96±0.62%；P=0.003),并在难治性癫痫患者、发作频率>=3次/月、NHS3>=16分、VA>=30分的癫痫患者,其降低程度具有极显著意义。使用促红细胞生成素干预后,原发性癫痫患者外周血PBMC中CD4+CD25high调节性T细胞比例显著上升(P=0.006), PBMC分泌的TNF-α、IFN-γ浓度均降低,其中TNF-α浓度的差异具有统计学意义(P=0.004)。结论：原发性癫痫患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞比例降低,在难治性癫痫患者以及严重程度较高的患者中更为明显。上调外周血CD4+CD25highT细胞比例,可下调Th1类细胞因子水平,提示CD4+CD25high调节性T细胞可能是调节原发性癫痫患者外周血Th1类细胞因子水平的免疫学靶点