绿木霉抗真菌代谢物及其对水稻纹枯病菌的抑制作用

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水稻纹枯病是水稻三大病害之一,是由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)引起的。立枯丝核菌产生菌核(sclerotia)结构,菌核具有抗逆性、忍耐极端环境条件的能力,因而菌核在病原菌的存活和传播中起着关键作用。由于菌核的特性,该病害也成为生产上最难防治的病害之一。本实验室已筛选出了绿木霉(Trichoderma virens)菌株TY009,其代谢产物可抑制立枯丝核菌(Rhizoctonia solani AG 1-1A)菌株HZ001的菌核形成。在此基础上,本研究拟分离抑制菌核形成的活性物质,并评价该菌株的生防潜力。 本试验通过木霉菌株TY009代谢物对立枯丝核菌HZ001菌株菌核形成的抑制作用的研究发现,代谢物的抑制主要在菌核形成前和开始阶段,一旦菌核形成后就几乎没有作用。代谢物对立枯丝核菌菌丝的抑制试验表明,代谢物能完全抑制立枯丝核菌菌丝的生长。 通过木霉代谢物透过不同孔径大小透析膜的试验结果显示,活性物质的分子量小于1000Da。经用乙酸乙酯提取硅胶板薄层层析分离,获得3个组份(Rf值分别为0.93、0.76和0.43);生物活性测定结果表明,Rf0.43组分是代谢物中活性组份。制备层层析分离,获得5mg活性组份样品;柱层析分离获得20mg活性组份样品。紫外光谱分析结果显示,活性组份的最大吸收峰在232nm处。用高效液相色谱一质谱仪分析表明,活性组份是分子量约为674。该分子量比已报道的木霉菌属中获得的所有抗菌素的分子量都大,可能是一个新的抗真菌的化合物。 通过木霉代谢物对立枯丝核菌菌核形成过程中的抗坏血酸含量的影响研究,发现代谢物影响了立枯丝核菌菌核形成过程中的还原型抗坏血酸盐和氧化型抗坏血酸盐的比值,可能是抑制菌核形成的机制之一。木霉菌株TY009对立枯丝核菌菌丝的寄生作用显示,木霉菌株TY009对立枯丝核菌有明显的拮抗作用,拮抗程度相似于生防菌哈茨木霉(T.harziqnum)菌株TC3和哈茨木霉(T.harzianum)菌株NF9。木霉菌株TY009对立枯丝核菌菌核的寄生作用显示,木霉菌株TY009抑制菌核萌发效果最显著。与哈茨木霉菌株TC3、哈茨木霉菌株NF9和棘孢木霉(T.asperellum)菌株T.G相比较,木霉菌株TY009抑制菌核萌发作用效果早,15d后使菌核萌发率降低至40%,而其余3个木霉菌株的抑制率仅在
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