背景和目的：　　近年来，很多研究发现不仅成熟的B淋巴细胞可以产生免疫球蛋白G（IgG），不同种类的肿瘤细胞、胎盘滋养层细胞、正常眼组织、肝细胞、神经元细胞等都可以产生IgG。这些非B淋巴细胞来源的IgG在肿瘤细胞的生长、增殖和迁移过程中发挥重要作用。Margni RA等学者研究发现在IgG中存在一种仅一端Fab异常糖基化的IgG，约占正常人外周血血清总IgG的15％，在妊娠女性及肿瘤患者中糖基化IgG的比值升高，自身免疫病病人血清中比值降低。这种非对称的IgG在与抗原结合后不能引起下游的补体活化、ADCC、调理作用等免疫效应，因而不能消灭靶向抗原。本研究的目的在于研究肿瘤细胞来源的 Fab糖基化的IgG的生物学功能，特别是在肿瘤免疫逃逸过程中可能发挥的重要作用。　　材料与方法：　　1.材料采集汕头大学医学院第一附属医院检验科病人外周血血清共29例，其中肿瘤病人9例，中、晚期妊娠体检血清10例，健康体检中心体检健康人血清10例。抽取正常人外周静脉血60ml用于血细胞分离涂片。收集汕头大学医学院附属肿瘤医院病理科新鲜肿瘤组织30例。　　2.血清或组织总 IgG的提取离心后的血清或肿瘤组织匀浆后提取的总蛋白用装有rProtein G的亲和层析柱纯化，与层析柱结合的蛋白质即为总IgG。　　3.分离对称、非对称IgG利用Con A Sepharose4B层析柱，将纯化的IgG加入层析柱，层析柱上的Con A可与高甘露糖型IgG结合，未结合的IgG即为对称IgG。　　4.间接ELISA实验通过ELISA测出样品中总IgG和对称IgG的量，再间接计算出非对称IgG的比值。　　5.IgG Fab与Fc片段的制备用木瓜蛋白酶处理IgG，将其切成Fab段和Fc段，用Protein A柱子纯化Fc及未消化的IgG全分子，剩下的即为Fab段。　　6. IgG分子、Fab、Fc的生物素（biotin）标记用biotin标记试剂盒将蛋白质标记上生物素，作为一抗用于免疫组化和蛋白质印记技术中。　　7.外周血涂片的制备加入淋巴细胞分离液，利用密度梯度离心法，使新鲜血液分层，分离不同血细胞制成细胞悬液，利用细胞涂片离心机进行涂片。　　8.银染将提取的蛋白质进行SDS-PAGE胶分离，再进行硝酸银染色技术，以检测目的蛋白的纯度。　　9.免疫细胞化学染色和免疫组织化学染色技术检测非对称IgG与外周血细胞及肿瘤组织中相互作用的细胞。　　10.染色-脱色-染色技术（stain，destain and restain，SDS）用酒精将IHC染色后第一个抗体的阳性信号退去，再在同一张片子上孵育另外一种抗体，从而检测多种抗体的染色部位是否重合，进行共定位。　　11.蛋白质印记技术（Western blot）用于检测与IgG反应的相关蛋白。　　12.酶切去除蛋白质的糖链糖苷酶F（PNGase F酶）和内糖苷酶F1、F2、F3切除蛋白质IgG相应部位的糖基，以研究糖链对蛋白质功能的影响。　　13.蛋白质芯片目的是将对称、非对称的IgG进行分型；检测与对称、非对称IgG相互作用的蛋白质和小分子物质。　　结果：　　1.肿瘤病人及中晚期妊娠女性外周血非对称IgG的比值高于正常人；　　2.同一个肿瘤病人，肿瘤组织中非对称IgG的比值高于外周血浆；　　3.Con A结合的IgG的糖基位于重链的Fab段；　　4.非对称IgG可与外周血的中性粒细胞和单核细胞的甘露糖受体反应；　　5.非对称IgG可与肿瘤组织中浸润的中性粒细胞和巨噬细胞甘露糖受体反应；　　6.非对称IgG的 Fab片段可以和不同物种来源的IgG相互作用；　　7.非对称的IgG以IgG2亚类最多；　　8.对称IgG与非对称IgG有32种差异结合蛋白。　　结论：　　肿瘤细胞来源的Fab糖基化的IgG可能在肿瘤免疫逃逸过程中发挥重要作用。