胡柚果肉乙酸乙酯组分对3T3-L1脂肪细胞摄取葡萄糖的影响

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常山胡柚是芸香科柑橘属植物柚与甜橙的杂交品种,含糖量较高,前期研究表明胡柚果肉的乙酸乙酯提取组分具有一定平衡血糖的功效。本论文在此基础上对该组分成分进一步研究,采用葡聚糖凝胶Sephadex LH-20对胡柚果肉冻干粉的乙酸乙酯组分进行分离,并优化分离条件,考察分离后的组分对3T3-L1脂肪细胞摄取葡萄糖的影响,采用液相色谱-质谱联用技术对胡柚果肉乙酸乙酯组分中的成分进行分析检测。研究结果如下:采用葡聚糖凝胶Sephadex LH-20对胡柚果肉乙酸乙酯组分进行分离,在单因素实验基础上设计四因素三水平正交试验。结果表明,影响Sephadex LH-20层析分离效果各因素的影响程度依次为:流速>流动相>高径比>上样量,最佳分离条件为:40%甲醇水溶液、流速0.2 ml/min、层析柱高径比30:1、上样量为柱体积的1%,在此条件下分离度之和(∑R)为4.08±0.16,分离得到6个组分。研究了分离后所得6个组分对3T3-L1脂肪细胞摄取葡萄糖的影响。结果表明:(1)组分1(1~25 μg/ml)、组分 2(1~100 μg/ml)、组分3(1~5 μg/ml)均能极显著促进3T3-L1脂肪细胞摄取葡萄糖(P<0.01);随着3个组分浓度增大,促进3T3-L1脂肪细胞摄取葡萄糖的效应随之降低;(2)组分4(1~100 μg/ml)能显著促进3T3-L1脂肪细胞摄取葡萄糖(P<0.01),促进葡萄糖的消耗量在此范围内保持平衡;(3)组分6(25~100μg/ml)能显著促进3T3-L1脂肪细胞摄取葡萄糖(P<0.01),呈剂量依赖性;(4)6个组分两两组合后,除组分3和组分4、组分5和组分6无相互作用外,其它组合存在显著拮抗作用,促进3T3-L1摄取葡萄糖的效应降低。采用液相-质谱联用技术对胡柚果肉乙酸乙酯组分进行结构鉴定,通过其一二级质谱图和标准品验证,推断得到圣草次苷、新圣草次苷、芸香柚皮苷、柚皮苷和新橙皮苷5个化合物。本研究对胡柚果肉乙酸乙酯组分中平衡血糖的成分进行了初步研究,为胡柚的深层次加工利用提供参考。
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