真菌寡聚糖的制备分析及对葡萄采后诱导抗病的研究

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来源于真菌和植物的寡聚糖在调节植物生长、发育及诱导植物抗病性方面,有着重要的作用。本研究从葡萄主要致病菌灰霉和链格孢霉的细胞壁中提取了寡聚糖,对寡聚糖进行了单糖组成分析,并以红地球葡萄为试材,就寡聚糖对葡萄的诱导抗病性进行了初步研究,为单糖组成分析和生物诱导抗病的应用提供了理论基础和借鉴,开启了果蔬采后保鲜的新思路。试验对葡萄灰霉的深层培养条件进行了研究,得出葡萄灰霉深层培养的最佳培养基配方为:葡萄糖3%,土豆汁4%,硝酸钾0.1%,磷酸二氢钾0.1%,硫酸镁0.05%。优化培养条件为:温度26℃,装液量100ml,pH值5.5,摇床转速120r/min。用大豆子叶法对几种诱导剂的诱抗活性进行了测定和比较,发现两种寡聚糖均具有诱抗活性,不同浓度处理存在诱抗活性峰值,峰值浓度为1000μg/mL。葡萄致病菌灰霉和链格孢霉细胞壁中提取物的测定结果显示,主要成分为糖和蛋白质。灰霉提取物中中性糖含量为954μg/mL,占细胞壁重量的24.92%;还原糖含量为8.039μg/mL,占细胞壁重量的0.21%;蛋白质含量为564μg/mL,占细胞壁重量的20.01%。链格孢霉提取物中中性糖含量为830μg/mL,占细胞壁重量的21.68%;还原糖含量为4.977μg/mL,占细胞壁重量的0.13%;蛋白质含量为533μg/mL,占细胞壁重量的18.91%。对寡聚糖单糖组成分析中,用PMP对单糖进行柱前衍生,经高效液相色谱(HPLC)分析,发现链格孢霉寡聚糖中有果糖、D-甘露糖、葡萄糖、D-半乳糖和D-阿拉伯糖五种单糖,五种单糖的摩尔比为3:5:10:4:1;灰霉寡聚糖中有果糖、D-甘露糖、葡萄糖、D-半乳糖和D-阿拉伯糖五种单糖,五种单糖的摩尔比为1:5:3:2:2。用两种寡聚糖对葡萄果粒诱导处理后接菌,试验结果表明,果实病斑直径和发病率均低于对照,链格孢霉寡聚糖处理效果要优于灰霉寡聚糖处理。对葡萄采后诱导抗病相关酶活性的测定结果表明,寡聚糖处理不同程度地诱导了葡萄果皮和果梗中的PAL、POD和PPO的活性,其中灰霉寡聚糖处理优于链格孢霉寡聚糖处理。
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