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目的:制备99Tcm标记的survivin mRNA反义肽核酸(peptic nucleic acid,PNA)探针,对比其在荷A549肺癌裸鼠模型及金黄色葡萄球菌炎性反应小鼠模型中的体内生物学分布及显像情况,探讨99Tcm-survivin mRNA反义肽核酸在肿瘤早期特异性诊断中的价值。方法:以survivin mRNA 240～251位碱基序列为靶序列人工合成survivin mRNA反义PNA(5′-CCCAGCCTTCCA-3′),在其5′端连接上四个氨基酸Gly-(D)Ala-Gly-Gly-,并引入一个γ-氨基丁酸(4-aminobutyric acid, Aba )作为隔离物消除空间阻碍,形成结构为Gly-(D)Ala-Gly-Gly-Aba-5′-CCCAGCCTTCCA-3′的survivin反义PNA化合物,再利用配体交换法对其进行99Tcm标记。用聚酰胺凝胶薄膜法和高效液相色谱仪(high performance liquid chromatography,HPLC)测定其标记率及稳定性。培养大量人肺腺癌细胞(A549),取对数生长的A549细胞用生理盐水制成细胞悬液,注射于每只BALB/c裸鼠的右前肢背侧皮下,SPF级(specific pathogen free,无特定病原体)环境下饲养,成瘤后约4～5周肿瘤长至直径约1～1.5cm,制成荷瘤裸鼠模型。取长势良好的金黄色葡萄球菌菌落制成生理盐水悬液,注射于每只昆明小鼠的右前肢背侧肌肉,48h后小鼠注射部位出现红、肿、活动障碍,制成炎性反应小鼠模型。选取瘤体大小相近,形态规整的20只荷瘤裸鼠,按随机数字法将其分为4组,每组5只。随机选取其中3组(1h组、2h组、4h组),每只裸鼠经尾静脉注入0.1ml约555KBq(15μCi)99Tcm-survivin mRNA反义PNA,分别于注射后1h、2h、4h眼静脉采血后,脱颈椎处死,取心、肝、肺、脾、肾、小肠、胃、骨骼、肌肉、肿瘤组织等称重后进行γ计数,同时测量两个标准源的放射性计数。计算每克组织的百分注射剂量率(percentage activity of injection dose per gram of tissue,%ID/g)及肿瘤/肌肉(target to non- target,T/NT)比值。剩余1组(5只),每只裸鼠经尾静脉注入0.1ml约37MBq (1mCi) 99Tcm-survivin mRNA反义PNA分别于1、2、4h行SPECT静态显像。同样的方法处理炎性反应组昆明小鼠。采用SPSS 13.0软件进行统计学处理。所有计量资料结果以x±s表示,两组间计量资料比较采用两个独立样本的成组t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果:99Tcm-survivin mRNA反义PNA的即刻标记率为(94.89±2.73)%,标记化合物在室温下放置4h后标记率无明显变化,标记率仍>95%。标记物经HPLC测定呈单峰。99Tcm-survivin mRNA反义PNA在荷瘤裸鼠的肝脏、肾脏中放射性分布最高,其次是脾、肠道、肿瘤;其它组织中放射性分布较少。在炎性反应小鼠体内亦是肝脏、肾脏放射性分布最高;其次是脾、肠道、胃;其它组织中放射性分布较少。经尾静脉注射99Tcm-survivin mRNA反义PNA后0.5h即可见肿瘤部位放射性聚集,随时间延长浓聚程度增强,至4h时显像较清晰,而炎性反应部位各时间点显影均较淡。将99Tcm-survivin mRNA反义PNA在肿瘤组与炎性反应组各时间点T/NT值进行比较,结果显示:肿瘤组各时间点T/NT值均高于炎性反应组,其中注射后4h肿瘤组与炎性反应组T/NT比值分别为3.69±1.13和2.03±0.47,差异有统计学意义(t=3.01,p=0.02)。结论:99Tcm-survivin mRNA反义PNA具有良好的生物学的性能,可在荷瘤裸鼠体内与高表达survivin基因的人肺癌A549肿瘤组织特异性结合,在炎性反应动物模型中摄取不明显,99Tcm-survivin mRNA反义肽核酸基因显像可通过其在肿瘤组织中的特异性浓聚区分肿瘤与炎性反应,为肿瘤的特异性诊断提供了一种可能的新方法。