肢体远程缺血预处理对兔肺缺血再灌注损伤的保护作用和可能机制的实验研究

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目的:研究肢体远程缺血预处理对肺缺血再灌注损伤的保护效果,并探讨其可能的机制。方法:健康日本大耳白兔18只,体重2.0~2.5 kg,雌雄不拘,随机分为:假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、肢体远程缺血预处理组(R组),每组6只。假手术组(S组)开胸后左侧肺门过阻断带但不结扎,旷置观察330 min;缺血再灌注组(I/R组)开胸左侧肺门过阻断带,旷置90 min后阻断左侧肺门,使左肺不张60min后再灌注180 min;肢体远程缺血预处理组(R组)开胸左侧肺门过阻断带,稳定30min后,捆绑双后肢10 min,松开10 min,反复3次行肢体远程缺血预处理,然后阻断左侧肺门60 min,再灌注180 min。分别于颈内动脉置管后(基础值)、再灌注15min、30min、60min、120min、180min各时间点行左侧颈内动脉抽取动脉血行血气分析检测PaO2、A-aDO2及呼吸指数(RI)(RI=A-aDO2/PaO2)。分别于颈内动脉置管后(基础值)、再灌注60mim、120min、180min各时间点行左侧颈内动脉抽取动脉血,采用ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)浓度。于再灌注180 min时处死动物,取左肺上叶组织,采用嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)、化学比色法测定髓过氧化物酶(MPO)活性、硫代巴比妥酸(TBA)法测定丙二醛(MDA)含量和免疫组化法测定肺组织P-选择素的表达,计算肺湿/干重比(W/D),观察肺组织病理学,进行弥漫性肺泡损伤(DAD)评分;取左肺下叶行支气管肺泡灌洗,计算肺通透性指数。结果:与S组比较,I/R组RI、MDA含量、MPO活性、P-选择素含量、W/D、肺通透性指数、DAD评分以及再灌注后血清IL-6、TNF-α浓度均升高(P<0.05或0.01),SOD活性和再灌注后血清IL-10浓度降低(P<0.05或0.01);与I/R组比较,R组RI、MDA含量、MPO活性、P-选择素含量、W/D、肺通透性指数、DAD评分以及再灌注后血清IL-6、TNF-α浓度均降低(P<0.05或0.01),SOD活性和再灌注后血清IL-10浓度升高(P<0.05或0.01);R组和S组间上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。R组和S组肺组织病理损伤程度较I/R组减轻。结论:肢体远程缺血预处理可能通过降低肺毛细血管通透性,升高抗氧化酶活性,增强机体在缺血再灌注过程中清除氧自由基的能力、减少氧化产物的生成,从而减轻肺缺血再灌注损伤,对缺血再灌注损伤的肺组织起到保护作用。肢体远程缺血预处理还可通过抑制促炎细胞因子IL-6、TNF-α的释放和P-选择素表达,增加抗炎细胞因子IL-10的合成,调整机体促炎与抗炎系统的平衡来实现肺的保护作用。
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