口蹄疫是严重危害畜牧业，造成较大经济损失的传染病。人们对于此病的研究一直以来都集中于用疫苗介导的特异性免疫上，而对于动物机体本身的天然抗病毒免疫却关注的较少。浙江大学实验动物中心在培育病毒敏感型Zmu-1∶DHP豚鼠过程中发现，在未接种疫苗的情况下对于原有的DHP黑色毛色的豚鼠对于O型口蹄疫病毒有天然抗性，攻毒后不出现死亡，而培育的Zmu-1∶DHP白色豚鼠对口蹄疫病毒敏感，攻毒死亡率为100％。对于这一现象，本文进行了一些体外实验研究。　　 本实验建立了豚鼠原代肾小管上皮细胞培养方法。首先将豚鼠腹腔麻醉后股动脉放血执行处死，无菌摘取豚鼠两侧肾脏后用镊子剥除肾脏外的脂肪及包膜，纵向剪开肾脏，去除髓质部，收集皮质部。用剪刀将皮质组织充分剪碎至1 mm3左右，放入研磨器中轻轻研磨至糊状后，转移至100目和150目重叠放置的不锈钢筛网上，用注射器内芯在网上轻轻研磨，同时加PBS冲洗，收集网下过滤的组织匀浆。在取得的组织中加入0.1％I型胶原酶，37℃消化20 min，收集上清液，剩余节段再加入胶原酶消化，重复消化2次收集的上清液，直到完全消化为止。将所得的细胞上清液经1000 rpm离心8 min得到细胞沉淀，计数后培养，可得到较纯的肾小管上皮细胞。　　 此外本实验也构建了含O型FMDV VP1基因的慢病毒载体，并包装成慢病毒。首先将合成好的含BamH1和EcoR1位点的上下游引物扩增保存载体上的VP1片段，通过PCR反应扩增出目的片段，将其复制到慢病毒载体中。通过四质粒包装系统，将PLP1，PLP2,VSVG，PLVX四种质粒包装成慢病毒并收集。　　 结合慢病毒转染O型口蹄疫VPI基因在原代肾小管上皮细胞内表达用来模拟口蹄疫病毒感染豚鼠状态。用淋巴细胞分离液提取外周血淋巴细胞作为效应细胞，以被幔病毒感染表达VP1的肾小管上皮细胞作为靶细胞，测得Zmu-1∶DHP黑色毛色的豚鼠的外周血中淋巴细胞对靶细胞的杀伤效应和Zmu-1∶DHP白色豚鼠显著差异(P＜0.01)，而不同豚鼠对照靶细胞之间显著不差异(P＞0.05)。在本试验的上清提取物中测得不同豚鼠细胞因子中细胞凋亡因子(FAS)，穿孔素(PF)，肿瘤坏死因子（TNF-α），颗粒酶A(GZ-A)，颗粒酶B(GZ-B)差异极显著(P＜0.01);白介素12(IL-12)差异显著(P＜0.01)。此外通过测序发现黑白豚鼠间的β8受体在836位至876位碱基存在差异。　　 以上的实验结果表明，两种品系豚鼠对于口蹄疫病毒的敏感差异的原因是由于天然免疫系统中NK细胞造成，由于受体结构的差异，两种品系豚鼠的NK细胞造成对VP1抗原识别上的差异，最终导致了不同品系豚鼠间对口蹄疫病毒体抗力的差别。因此本实验的结果对抗口蹄疫病毒天然免疫机制的研究有一定的帮助，值得进行进一步的探讨。