荧光标记技术是生物标记中的重要标记手段之一,近些年来磁性材料凭借其特殊的磁性能受到生物研究者的青睐。荧光材料和磁性材料的研究开发,备受瞩目。Fe3O4纳米磁性材料作为一种新的材料,因具有特殊的物理化学性质,如小尺寸效应、表面与界面效应和宏观量子隧道效应,表现出与常规磁性材料不同的性质。近些年来,由于磁性纳米材料在实际应用中的广泛前景,有关磁性纳米颗粒制备方法的研究受到了很大的重视。目前制备水溶性纳米颗粒的方法较多,但是合成出来的颗粒仍存在着许多缺点,如粒径均一性差,晶型不好,分散性差,合成方法复杂,容易氧化等等。目前本实验室利用油水界面法已经成功制备出CdS, ZnS, NaYF4等纳米颗粒,与此同时利用油水界面法合成油溶性的Fe3O4的报道较少,本实验采用油水界面方法合成性质良好Fe3O4纳米颗粒。另外肝癌是一种高危险性的恶性肿瘤,被称为当今世界的三大肿瘤杀手之一。因此,开发一种快速而廉价的检测方法,对提前预测肝癌并及时采取治疗措施显得尤为必要。研究者认为将荧光标记技术和磁性材料结合起来,将会提高疾病诊断的灵敏性,降低诊断成本。在本课题组前期工作的基础上,首先在低温下油相中合成了NaYF4基质材料并进行稀土掺杂,然后运用原位聚合法将水溶性高聚物聚丙烯酸(PAA)修饰到其表面,获得了综合性能更佳的NaYF4:Yb,Er/NaYF4/ Polymer纳米复合材料。本课题按照如下几个方面展开：首先利用油水界面法合成纳米颗粒,探索碱液种类和浓度,表面活性剂类型和用量,反应温度和时间,分散剂和助表面活性等因素对该体系的影响进。生成的产物用XRD, FTIR, VSM, TEM, TGA进行表征。结果表明：合成出来的是粒径约为3.5 nm表面由油酸包覆,具有较强磁性油溶性的Fe3O4磁性纳米颗粒。其次,本论文将两种纳米颗粒和BSA连接的实验条件进行探索,实验分别从以下四个因素进行探索：最大连接剂用量,最大蛋白连接量。实验采用Lowory方法,检测连接上蛋白的含量,进而确定最佳条件。结果表明：1M EDC用量：333μL; E/N配比：2：1；pH值：6.4；最大Pro (10g/LBSA)连接量：300μL(NPs),400μL(UNPs)。最后,本论文最后利用探索出的最佳连接条件,将两种纳米粒子和AFP两种抗体Ig301,和Ig302连接,制备出免疫探针。采用SDS-PAGE电泳、FTIR、荧光分光光度计和Lowory方法进行检测。实验结果表明,两种抗体都成功连接在纳米颗粒表面,其连接量为Ig301:1.77μg/mL, Ig302:2.55μg/mL