论文部分内容阅读
[目的]:观察研究大蒜素(Allicin)对体外培养的人胆管癌细胞株(QBC939)生长增殖抑制和凋亡诱导的作用,以及对细胞体外迁移、侵袭能力的影响,为胆管癌临床治疗探索新方法。[方法]:1.测定体外培养的人胆管癌细胞活力、贴壁率,应用四唑盐比色法(MTT)测定胆管癌细胞在不同时间、不同浓度的OD值,绘制生长曲线,确定实验的最佳细胞培养时间;2.四唑盐比色法(MTT)测定不同时间、不同浓度的大蒜素制剂(Allicin)对人胆管癌细胞株的生长增殖抑制率并于倒置显微镜观察细胞形态学变化,确定药物的IC 50;3.流式细胞术检测IC50浓度大蒜素制剂(Allicin)对人胆管癌细胞周期的影响及分析证实凋亡的存在;4、细胞划痕实验检测大蒜素(Allicin)对人胆管癌细胞迁移、侵袭能力的作用。[结果]:1.人胆管癌细胞株常规培养,存活率均>95%符合本实验要求,MTT测定的生长曲线提示按照6×103/孔的密度接种于96孔板内可提供足够的细胞生长空间及营养成分,使细胞接种12小时后,适应新环境,逐渐进入快速繁殖期。2.选取细胞接种于96孔板后的24小时左右,该区间能够保证细胞始终处于一个稳定的对数生长期,在此条件下MTT法检测不同浓度大蒜素对人胆管癌细胞生长抑制率具有时间和剂量依赖性并确定IC50为7.25mg/L。3.流式细胞术检测结果显示,大蒜素诱导人胆管癌细胞凋亡,IC50药物浓度作用于人胆管癌细胞株(QBC939)细胞24h后,与对照组比较,G0/G1期细胞减少(P<0.01),G2/M期细胞增多(P<0.01),S期细胞无明显变化(P>0.05)。4、细胞划痕实验结果显示大蒜素能够明显降低人胆管癌细胞的迁移、侵袭能力。[结论]:本实验提示:1.大蒜素(Allicin)在体外实验中对人胆管癌细胞增殖具有抑制作用,且呈浓度、时间依赖性。2.大蒜素(Allicin)能诱导人胆管癌细胞株凋亡作用并使细胞周期阻滞于G2/M期。3.大蒜素(Allicin)能够明显降低人胆管癌细胞的迁移、侵袭能力。4.可能是有前景的抑制胆管癌细胞的药物。