抗冻蛋白是存在于鱼类、植物以及昆虫等真核生物体内的能够降低溶液冰点而对熔点影响很小，从而产生热滞活性保护细胞免受冻害的一类蛋白质。新疆特有的荒漠昆虫小胸鳖甲的抗冻蛋白基因（MPafp）在冬季表达量很高，在炎热的夏季也有一定的表达。高、低温胁迫昆虫后抗冻蛋白基因都能上调表达。为了研究小胸鳖甲抗冻蛋白基因MPafp的表达调控机理，本研究利用热不对称交错PCR原理，根据小胸鳖甲抗冻蛋白基因MPafp149设计三条嵌套的特异性引物扩增MPafp149的5’侧翼区序列，并对其表达调控活性进行了初步探究。主要结果如下：1.克隆得到了大小为946bp的MPafp1495’侧翼区序列，软件预测发现起始密码子ATG上游52bp处存在转录起始位点，预测在-27bp至-31bp处为TATA盒，序列为TATATAA，在-632bp至-647bp为CCAAT元件，-887bp至-898bp和-654bp至-665bp为核内调控因子cAMP应答元件CRE，-224bp至-234bp为与抗逆相关转录元件Myc，在TATA盒上游-481bp至-490bp为热激因子结合元件NGAANNTTCN，-569bp至-580bp为Myf元件，-522bp至-533bp为Mef-2元件，-368bp至-378bp和-462bp至-472bp为Ets元件，这三种元件与细胞的分化和肌细胞的增殖有关。-874bp至-885bp为核转录增强因子Tef元件，-827bp至-841bp为核转录因子LSF元件。2.利用植物表达系统验证启动子活性结果显示，MPafp149启动子不同长度片段均可以启动GFP报告基因在洋葱表皮细胞的瞬时表达，在细胞的各个组织中都有GFP的表达，说明抗冻蛋白基因启动子不同长度片段均具有启动子活性。3.双荧光素酶报告基因系统结果显示，常温和低温下启动子片段之间的荧光素酶活性无明显差异，但是高温处理后启动子活性之间存在一定差异，但是活性并不高，启动子的表达调控活性还需进一步验证。这对于研究昆虫抗冻蛋白基因的表达调控奠定了初步的基础，具有一定的初探意义。