光学探针与铜锌超氧化物歧化酶、胺类小分子相互作用的研究及应用

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苯胺是一种广泛应用的工业原料,但它对人体有一定的毒害作用。如果排放废水以前没有把其中的苯胺处理彻底,则会污染天然水体。盐酸多巴胺是一种抗休克药,临床适用于各种类型休克,如中毒性休克、大出血休克、心源性休克、中枢性休克,以及心脏停搏时的起搏升压等。酪氨酸(Tyr)在人体内含量的稳定与否直接反映人体的健康状况。如果人体酪氨酸水平不正常就会出现心情低落或者其他情绪异常等症状,还可能引起帕金森病。铜锌超氧化物歧化酶是一种广泛存在于动植物体内且研究最为普遍的超氧化物歧化酶,它可以催化O2-发生歧化反应,生成O2和H2O2,从而清除机体内生化代谢产生的有害物质——O2-。肝素最早临床应用的天然抗凝剂,是一种安全高效的抗血栓类药物。本文主要以上述四个方向为目标,以分子光谱(荧光、紫外)为研究手段,分别对含有两个活性氯原子的新型荧光探针与胺类小分子的相互作用以及药物、药物-稀土离子络合物与铜锌超氧化物歧化酶、肝素的相互作用及其分析应用进行研究,共分为五章。第一章,综述了论文的情况及目前国内外的研究现状。第二章,通过简单的一步反应合成了1,5-二(4,6-二氯三嗪)-氨基萘并从红外、核磁和质谱等方面对其进行表征。在一定的条件下,1,5-二(4,6-二氯三嗪)-氨基萘中的活性氯原子能够和胺类小分子中的氨基上面的氢原子结合,生成小分子氯化氢;另一产物的结构和1,5-二(4,6-二氯三嗪)-氨基萘相比发生了变化,从而荧光强度发生改变。在最佳实验条件下,1,5-二(4,6-二氯三嗪)-氨基萘的荧光强度在加入胺类小分子以后得到极大增强,并且在一定的范围内增强的荧光强度和胺类小分子的浓度成正比,从而建立起一种测定胺类小分子的新荧光法并能成功应用于测定实际样品中的胺类小分子。第三章,以稀土金属离子铕-四环素作为荧光探针,研究了该探针与铜锌超氧化物歧化酶的相互作用及其分析应用。往铕-四环素体系中加入铜锌超氧化物歧化酶后,铕的特征荧光得到数倍的增强,根据这一性质,建立了一种新的测定铜锌超氧化物歧化酶的方法。该方法简单可行,灵敏度高,干扰少,成功地用于实际样品的测定。第四章,以铜锌超氧化物歧化酶作为研究主体,以四环素类药物强力霉素、土霉素、四环素及喹诺酮类药物依诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星作为研究客体,利用非辐射能量转移和荧光猝灭理论,研究了药物对铜锌超氧化物歧化酶的猝灭机制,求出了二者的结合常数,又根据热力学函数,讨论了二者的相互作用类型。同时,采用邻苯三酚自氧化法研究了药物对铜锌超氧化物歧化酶活性的影响,并通过动物活体实验证明了其影响一致性,可作为临床上铜锌超氧化物歧化酶活性变化时的参考。第五章,洛美沙星与稀土离子铽存在分子内能量转移,发射出铽的特征荧光,因此可将其配合物作为荧光探针检测肝素。本章利用荧光光度法和紫外吸收分光光度法探讨了铽、洛美沙星与肝素的作用机理以及体系的荧光特性,并运用荧光光度法建立了灵敏简便的测定肝素的方法,成功地用于针剂中肝素测定及血清中肝素回收率测定。
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