741毛白杨等再生体系建立及YCPA2基因转化的研究

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qq969023319
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究以小×胡杨(Populus simonii×P.euphratica)、741毛白杨(PopulusaIba×(P.davidiana×P.simonii)×P. tomentosa)为试材,进行了再生体系、农杆菌介导的抗逆基因转化研究,以期培育出抗逆境的基因工程杨树新品系。主要结果如下: 1、以小×胡杨为研究对象,在建立组培再生体系过程中出现了外植体褐化现象,对影响小X胡杨组培中褐化的因素进行了研究,并在一定程度上控制了小×胡杨褐化的发生,为下一步组织培养奠定了基础。试验结果表明:6-BA和IBA浓度的变化对褐化现象基本没有影响;外植体经过5℃,12h预处理、使用1/2MS培养基、低温暗处理和常温暗处理都能在一定程度上减轻褐化;抗氧化剂和吸附剂对褐化控制作用较为明显,其中PVP效果较好,VC次之,Na<,2>S<,2>O<,3>最差。 2、通过对741毛白杨的组培再生体系的优化,得到了高频再生体系,同时阐述了激素浓度、叶片来源、黑暗培养、叶片放置方式等对叶片再生体系的影响。741毛白杨无菌苗叶片的最佳不定芽诱导培养基为MS+6-BAl.0mg/L+IBA0.1mg/L;选择无根的无菌试管苗的叶片作为试验材料,进行3d黑暗培养等方法都可提高不定芽诱导效率;不走芽继代培养基为MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.05mg/L;不定芽生根的最佳培养基为1/2MS+IBA0.05mg/L。741毛白杨叶片不定芽诱导的潮霉素临界浓度为3mg/L;不定芽生根潮霉素临界浓度为5mg/L;在筛选过程中选用Cef400mg/L作为抑菌抗生素浓度。 3、对影响农杆菌介导的杨树遗传转化的几个因素进行了探讨。结果表明,MS液体培养基作为工程菌液获得的抗性芽再生频率明显高于YBP液体培养基作为工程菌液获得的抗性芽再生频率;共培养时间不同潮霉素抗性芽诱导率也不同,共培养时间为3d时,诱导率最高,与其他处理差异显著;共培养培养基加入乙酰丁香酮时,pH调到5.2诱导潮霉素抗性芽效果最显著;在本试验中,推迟筛选对转化效率的影响不大。 利用农杆菌对741毛白杨进行抗逆境基因(YCPA2)转化,经PCR检测,在抗性植株DNA中扩增出与目的基因大小相同的片断,初步确认目的基因已经整合到741毛白杨基因组中。
其他文献
林业数据处理中,数据密集、计算密集、资源分布、异构等问题制约了行业应用和信息化发展。数字林业平台(DFP)是基于网格技术提出的实现数字林业的一个技术体系,它包括从信息获
昆明地区气候四季如春,年际温差小;但日温差却比较大,冬季气温变化尤为明显。受寒潮或寒流影响,昆明市冬季突发的非节律性最低气温常常下降到零度甚至更低,使得蒲葵、樱花、小叶榕
为了有效地繁殖,并进一步保存秦巴山区的野生百合,本试验以秦巴山区野生的宜昌百合〔L.leucanthum (Baker) Baker〕和卷丹(L.lancifolium Thunb)为主要材料,分别研究了试管苗
广泛存在于自然界的化感作用对解释植物个体、种间的相互作用机制以及植物群落的构建都起着重要的作用,并对农林生产有重要的影响,因此,深入研究化感作用具有重要的科学和实
大庆市因石油而建立——是名副其实的石油城,除了拥有丰富的石油资源外,同样拥有着丰富的滨水资源。然而在油城发展的历程中,滨水资源成为了城市建设和石油资源开发的牺牲品,
林下植被是森林林下灌木、草本和藤本植物等的统称,是森林生态系统的重要组成部分。森林生态系统中林下植被的分布和生长特征受到林分乔木层特征的限制;另一方面,林下植被也通
本文运用景观规划学、景观设计学、园林植物学、景观生态学、心理学、美学等相关学科理论,以全椒县襄河景观带为研究对象,在配置植物现状调查的基础上,通过对应用植物的季相
ASTER是美国最先进的卫星之一Terra(EOS-AM1)搭载的对地观测传感器,它不仅具有15米的高空间分辨率,而且有从可见光到远红外的14个观测波段,并且每一景图像都包含了一个立体像对,