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目的建立一种基于PCR技术的简便分型方法,对肺炎链球菌进行血清型分型研究,初步掌握肺炎链球菌主要流行血清型/群、了解血清型/群的分布状况；建立并优化本实验室的肺炎链球菌PFGE分型方法,将之应用于肺炎链球菌分离菌株的分型研究,初步揭示我国肺炎链球菌分离株的分子特征；对分离菌株进行抗生素敏感性检测,了解肺炎链球菌临床分离菌株对常用抗生素的敏感性及耐药谱变化情况；建立涵盖血清学信息、分子特征、耐药性情况等资料的肺炎链球菌分离菌株的数据库。方法收集肺炎链球菌分离菌株144株,对菌株进行鉴定、血清分群；设计、合成了14对引物,分别用来检测肺炎链球菌的种特异性基因以及肺炎链球菌的血清型/群特异性基因；并对反应体系以及对各组引物的反应浓度进行了优化,建立了一种基于PCR技术的快速、简便、成本较低的肺炎链球菌分型方法。参考已经发表的肺炎链球菌PFGE文献,对脉冲场凝胶电泳的条件进行优化,并以优化后的条件对全部分离菌株进行PFGE分型,了解肺炎链球菌的分子流行病学分布。参考CLIS标准,以K-B(Kirby-Bauer)纸片扩散法检测肺炎链球菌分离菌株对6种临床常用抗生素的敏感性,并分析菌株的耐药谱变化趋势,为指导临床用药提供依据。结果全部引物均具有高度的种或血清群／型特异性,检测灵敏度1-10pg/μl；对144株分离菌株进行分型分析,PCR分型方法可分为10个血清型/群,PCR分型结果与传统血清分型基本相符。全部菌株脉冲场电泳结果经分析后可分为92个脉冲场型,未发现优势的克隆群菌株；脉冲场带型呈现一定的血清群特异性,相同血清群的菌株其脉冲场带型相似。检测了肺炎球菌对米诺环素、氧氟沙星、氯霉素、阿奇霉素、利福平、复方欣诺明等六种抗生素的敏感性,发现肺炎链球菌对多种抗生素出现耐药菌株。结论初步建立了13种血清型/群肺炎链球菌PCR分型技术,可用以鉴别人群中主要流行的肺炎链球菌血清型/群。PFGE对肺炎链球菌具有很好的分辨率,显示了良好的流行病学分型能力。本研究中收集的肺炎链球菌菌株耐药形势复杂,除未对氧氟沙星发现耐药菌株外,对其他5种抗生素均发现耐药菌株；且大多数菌株对2种或2种以上抗生素同时耐药。