【摘 要】
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目的:观察雪旺细胞(SCs)对大鼠视网膜睫状神经营养因子(CNTF)表达变化的影响,探讨SCs对视网膜神经节细胞(RGCs)的保护机制。方法:双酶消化法分离、培养、纯化大鼠SCs;玻璃体
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目的:观察雪旺细胞(SCs)对大鼠视网膜睫状神经营养因子(CNTF)表达变化的影响,探讨SCs对视网膜神经节细胞(RGCs)的保护机制。方法:双酶消化法分离、培养、纯化大鼠SCs;玻璃体腔内注射SCs,3d后前房灌注法建立大鼠急性高眼压模型;模型建立后第1d、3d、7d、14d、21d采用RT-PCR方法检测大鼠不同时期视网膜CNTFmRNA表达情况;通过免疫组化二步法检测其蛋白水平的表达差异。结果:成功分离、培养了大鼠SCs;建立了急性高眼压模型。RT-PCR结果显示,正常大鼠视网膜组织CNTFmRNA表达微弱,急性高眼压损伤后CNTFmRNA的表达逐渐增强,于损伤后3-7d表达量达到峰值,之后表达量开始下降,DMEM/F12干预组CNTFmRNA的表达变化情况与急性高眼压组相类似,SCs干预组中CNTFmRNA的表达量在每个时间点都高于急性高眼压组和DMEM/F12干预组,各时间点差异均有显著性(P<0.05)。视网膜切片免疫组织化学染色结果与PT-PCR表达相符,染色阳性产物定位显示,在正常大鼠视网膜神经节细胞层(GCL)有少量CNTF阳性产物表达,急性高眼压后表达有所增加,在视网膜GCL、神经纤维层(NFL)、内核层(INL)均可见到CNTF阳性产物,SCs干预组在3d、7d、14d可见CNTF阳性产物在视网膜GCL、NFL、INL、外核层(ONL)染色明显。结论:大鼠急性高眼压后玻璃体腔内注射SCs能使视网膜CNTF的表达水平升高,提示SCs可能在视网膜及视神经损伤的修复过程中发挥了一定的作用。
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