狄草谷网蚜（Sitobion miscanthi）作为危害小麦的优势种之一,长期以来,其防治方法主要以化学农药为主,主要杀虫剂包括有机氯类、有机磷类、氨基甲酸酯类和拟除虫菊酯类等。然而化学杀虫剂持续大量的使用,给麦蚜造成了很大的杀虫剂抗性选择压,进而导致各地区麦蚜对常用杀虫剂产生了不同程度的抗性。因此,本文以狄草谷网蚜为研究对象,通过转录组测序技术筛选出经吡虫啉处理后差异表达的细胞色素P450基因,并通过实时荧光定量PCR（qPCR）以及RNA干扰（RNAi）等技术对其功能进行验证,而后通过克隆主效P450基因5’非翻译区（5’UTR）序列、检测启动子活性以及沉默转录因子Nrf2基因等实验进行分析,进而揭示P450介导的狄草谷网蚜对吡虫啉的抗性机制。结果如下:1.采用带虫浸液法测定吡虫啉对狄草谷网蚜三龄若虫的触杀毒力,结果表明,吡虫啉对狄草谷网蚜三龄若虫的致死中浓度LC₅₀为1.341 mg/L,10%致死浓度LC₁₀为0.506mg/L。2.用吡虫啉(LC₁₀)处理狄草谷网蚜三龄若虫24 h后,通过转录组测序技术筛选出差异表达的细胞色素P450基因。结果表明,共有108个差异表达的P450基因,其中37个P450基因表达上调,71个P450基因表达下调。3.通过qPCR分析2个P450基因CYP6DD1和CYP307A2在吡虫啉抗性品系（SM-R）和敏感品系（SM-S）中的差异表达。结果表明,2个P450基因在SM-R品系中的表达量显著高于SM-S品系,分别为SM-S品系的2.23和3.16倍。4.对狄草谷网蚜饲喂ds CYP6DD1和ds CYP307A2 24h后,利用qPCR检测沉默效率。结果表明,与对照（dsGFP）相比CYP6DD1和CYP307A2基因的沉默效率分别达到了36.3%和45.3%。饲喂ds CYP6DD1和ds CYP307A2 24 h后,再用吡虫啉(LC₁₀)处理24h,狄草谷网蚜的死亡率上升,分别为对照组（dsGFP）的1.87和2.09倍。5.为进一步研究CYP6DD1和CYP307A2表达调控机制,克隆了CYP6DD1和CYP307A2基因的全长及其5’非翻译区。通过构建含有启动子缺失片段的基因报告载体,瞬时转染昆虫Sf9细胞发现CYP6DD1的p HN5,p HN4和p HN3三个重组载体及CYP307A2的p HN5,p HN4和p HN3三个重组载体的启动子活性显著高于对照p GL4.11。经生物信息学软件预测,分别在CYP6DD1启动子区-344到-338 bp处和+159 bp到+165 bp处,CYP307A2启动子区+103 bp到+113 bp处预测到转录因子Nrf2的结合位点。通过RNAi沉默Nrf2基因后,CYP6DD1和CYP307A2的表达量分别下降了56.4%和45.1%。饲喂ds Nrf224 h后,再用吡虫啉(LC₁₀)处理24h,狄草谷网蚜的死亡率上升,为对照组（dsGFP）的2.87倍。