论文部分内容阅读
原发性肝癌是肝细胞或肝内胆管上皮发生的恶性肿瘤。尽管其治疗方法有了很大进步,但其复发和转移仍十分常见。因此,探索肝癌侵袭转移机制,寻找新的临床治疗靶点,在肝癌的治疗中具有重要作用。 microRNA是一些细胞程序的调节因子,研究发现人类肝癌/肝癌伴转移组织中miRNAs存在差异表达,因而,探索miRNAs与肝癌侵袭转移等生物学特性的影响很有必要。 目的:检测肝癌/肝癌伴转移组织中差异表达的miRNAs,观察miR-148a与肝癌侵袭转移的关系,为肝癌的基因治疗提供新的实验依据。 方法:应用miRNA芯片技术检测肝癌/肝癌伴转移组织中差异表达的miRNAs,筛选差异表达的miRNAs; 利用Transwell小室法和细胞划痕实验检测肝癌细胞侵袭与迁移能力; 采用明胶酶谱法及蛋白免疫印记法(Western blot)检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达情况,进而,分析其与肝癌侵袭和转移的关系。 结果:miRNA芯片技术结果显示miR-148a在肝癌伴转移组织中显著下调,半定量RT-PCR结果显示,和对照组相比,LV-miR-148a感染组肝癌细胞表达miR-148a明显增高,Transwell小室法及细胞划痕实验结果显示过表达miR-148a明显抑制肝癌细胞7721侵袭迁移能力,明胶酶谱法与Western blot结果显示过表达miR-148a降低肝癌细胞7721中MMP-2和MMP-9蛋白的表达。 结论:miR-148a在体外能抑制肝癌细胞7721的侵袭与迁移,其机制可能与下调MMP-2和MMP-9的表达水平有关。