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本文以黑骨藤为材料,采用天然产物化学方法,确定黑骨藤单方及复方有效成分的提取工艺。主要研究内容为:黑骨藤单方及复方有效成分提取工艺;龙胆苦苷、延胡索乙素、杠柳苷HPLC含量测定方法的建立;最佳提取工艺药效验证实验。
黑骨藤单方有效成分提取工艺:以总黄酮、总甾体皂苷、杠柳苷为考察指标,通过单因素以及L9(34)正交实验得到最佳提取工艺为:料液比1∶20,温度50℃,提取2次,每次30 min,超声波提取机的超声间隙时间8 s/2 s,,功率800 W。在此条件下,总黄酮含量为7.124%,总甾体皂苷含量为5.867%,杠柳苷含量为0.154%。
利用高效液相色谱法建立龙胆苦苷、延胡索乙素、杠柳苷含量测定方法,绘制标准曲线,测定最低检测限、精密度、加标回收率。结果龙胆苦苷、延胡索乙素、杠柳苷在其线性范围内有良好的线性关系,该方法的精密度、加标回收率符合含量分析要求,测定样品龙胆苦苷、延胡索乙素、杠柳苷含量准确可靠。
黑骨藤复方有效成分提取工艺:以总黄酮、总甾体皂苷、总生物碱、龙胆苦苷、延胡索乙素、杠柳苷为考察指标,通过单因素以及L8(27)正交实验得到最佳提取工艺为:料液比1∶10,温度60℃,提取1次,每次30 min,超声波提取机的超声间隙时间5 s/3 s,,功率800 W。在此条件下,总黄酮含量为2.499%,总甾体皂苷含量为4.874%,总生物碱含量为0.125%,龙胆苦苷含量为1.353%,延胡索乙素含量为0.049%,杠柳苷含量为0.113%。
药效实验验证黑骨藤单方及复方有效成分最佳提取工艺,说明黑骨藤单方及复方都具有抗炎效果,黑骨藤复方有效成分含量与药效有一定的量效关系。