目的:动态观察根管白色念珠菌生物膜形成过程中胞外DNA分布的图像,通过DNaseⅠ对生物膜形成的影响,研究胞外DNA在根管白色念珠菌生物膜形成过程中的作用。为临床上治疗生物膜相关性疾病提供理论基础。方法:在根管内提取白色念珠菌,在2.0cm2载玻片上形成白色念珠菌生物膜,激光共聚焦显微镜下观察不同培养时间的生物膜胞外DNA分布的图像;在白色念珠菌生物膜生长的不同时段加入DNaseⅠ,用激光共聚焦显微镜观察DNaseⅠ作用前后白色念珠菌生物膜图像的变化。同时用XTT减低法定量分析DNaseⅠ作用前后生物膜内细胞的生长活力的改变,每组均有8个孔作为重复,取平均值,计算均数和标准差,应用软件SAS9.1.3进行数据分析。结果:根管白色念珠菌生物膜中含有胞外DNA,随着生物膜形成时间的延长,胞外DNA分布增多;早期的白色念珠菌生物膜经DNaseⅠ处理后只有零落的细胞分布,中期的生物膜经DNaseⅠ处理后只有小量的微菌落形成,成熟期的生物膜经DNaseⅠ处理后只形成了疏松的网状结构;XTT实验显示经DNaseⅠ处理后,各个时间段实验组的生物膜生长活性都低于对照组,在生物膜形成的早期更为明显。结论:白色念珠菌生物膜的特点是对临床常规抗真菌药物明显耐药,生物膜的胞外基质包括多糖、蛋白质、DNA等,胞外DNA与细胞的聚集有关。本实验结果表明根管白色念珠菌生物膜中含有胞外DNA,并随着培养时间的延长,生物膜内胞外DNA增多,DNaseⅠ在各个时段都明显阻断了白色念珠菌生物膜的形成,降低了白色念珠菌生物膜的生长活性,尤其是在生物膜形成的早期。由此可见,胞外DNA在根管内白色念珠菌生物膜形成过程中起着重要的作用。