针灸对顺铂所致肾损伤小鼠氧化应激反应影响的研究

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目的
  本课题采用健康雄性昆明种小鼠制备顺铂化疗肾损伤模型,通过对比针灸治疗前后,小鼠肾脏组织病理学的改变,从细胞形态学方面观察针灸对顺铂化疗小鼠肾脏的影响,并运用酶联免疫法(ELISA)检测小鼠肾脏组织内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)以及超氧化物歧化酶(SOD)的含量,基于氧化应激反应初步探讨针灸修复、改善顺铂所致肾损伤的作用机理。
  方法
  将70只健康雄性SPF级小鼠适应性喂养3天后,称重,剔除两极,保留60只。用随机数字表法将小鼠分为空白组(A)、模型组(B)、针刺组(C)、艾灸组(D),每组15只,染色编号。各组小鼠以0.01mL/g的剂量采用腹腔注射的方法给药,空白组给予0.9%Nacl溶液,模型组、针刺组、艾灸组给予1mg/mL浓度的顺铂溶液,共给药1次,24小时后模型成功[1]。针刺组和艾灸组选取“大椎”、“肝俞”(双)、“肾俞”(双)、“足三里”(双)四穴进行治疗,针刺组采用管式进针法,各穴位进针3mm,静留针6min;艾灸组每两个穴位为一组进行艾灸治疗,每组穴位灸3min共6min;每日1次,连续治疗5天,空白组和模型组仅陪同固定,不予治疗。在治疗前后,每组随机选取3只小鼠,摘取肾脏以4%中性多聚甲醛固定,进行肾脏组织病理学观察,其余小鼠采用酶联免疫法(ELISA)检测肾脏组织中ROS、SOD、MDA的含量,整理数据,运用SPSS24.0统计软件进行分析。
  结果1DDP对小鼠肾脏组织形态的影响:治疗前,空白组小鼠肾小管及肾小球结构清晰,细胞排列较齐;模型组、针刺组、艾灸组小鼠肾小管管腔内可见脱落的上皮细胞,肾小球萎缩,囊腔扩大,血管壁增厚。表明以0.01mL/g的顺铂剂量,腹腔注射1次,可成功制备小鼠肾损伤模型。
  2针刺和艾灸对DDP小鼠肾脏组织形态的影响:针刺和艾灸治疗后,与模型组相比,针刺组和艾灸组小鼠肾小管上皮细胞脱落情况减轻,肾小球结构有所恢复。表明针刺和艾灸均可以改善和修复DDP造成的小鼠肾损伤。
  3针刺和艾灸对DDP小鼠肾脏组织中ROS含量的影响:与空白组相比,模型组ROS含量上升,具有显著性差异(P<0.05);针灸治疗5天后,与模型组相比,针刺组和艾灸组ROS含量均下降,具有显著性差异(P<0.05);与针刺组相比,艾灸组ROS含量较低,具有显著性差异(P<0.05)。表明针刺和艾灸可减少ROS的含量,且艾灸优于针刺。
  4针刺和艾灸对DDP小鼠肾脏组织中MDA含量的影响:与空白组相比,模型组MDA含量上升,具有显著性差异(P<0.05);针灸治疗5天后,与模型组相比,针刺组和艾灸组MDA含量均下降,具有显著性差异(P<0.05);与针刺组相比,艾灸组MDA含量较低,具有显著性差异(P<0.05)。表明针刺和艾灸可减少MDA的含量,且艾灸优于针刺。
  5针刺和艾灸对DDP小鼠肾脏组织中SOD活性的影响:与空白组相比,模型组SOD活性下降,具有显著性差异(P<0.05);针灸治疗5天后,与模型组相比,针刺组和艾灸组SOD活性均上升,具有显著性差异(P<0.05);与针刺组相比,艾灸组SOD活性较高,具有显著性差异(P<0.05)。表明针刺和艾灸可提高SOD活性,且艾灸优于针刺。
  结论1针灸可降低DDP小鼠肾脏组织中ROS、MDA的含量,通过减轻ROS的
  脂质过氧化反应,减少脂质过氧化物MDA的产生,抑制氧化应激反应对肾脏组织的损伤。
  2针灸可提高DDP小鼠肾脏组织中SOD的活性,抑制和清除肾组织中活性氧的过表达,阻断其脂质过氧化反应,减少MDA的生成,使氧化与抗氧化之间达到动态平衡。
  3针刺和艾灸相比,艾灸更有利于通过增加SOD的活性,降低肾组织中ROS、MDA的含量,来修复和改善顺铂所致的小鼠肾组织损伤。
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