恶性黑色素瘤（黑色素瘤）是临床上常见的皮肤黏膜和色素性恶性肿瘤，也是发病率增长最快的恶性肿瘤之一。黑色素瘤系来源于能产生黑素细胞的恶性肿瘤，虽然可以发生于尿道、中枢神经系统和其他部位，但大部分皮损来源于皮肤。皮肤恶性黑色素瘤（cutaneous malignant melanoma，CMM）是皮肤致死率最高的恶性肿瘤，具有易转移、进展快、易耐药、对放化疗不敏感等特点。有数据统计显示，近年来全球黑色素瘤新发病例以3％-7%速度增长1。2014年数据显示，在美国76100患者被诊断为黑色素瘤，其中9710患者死亡2,3。虽然黑色素瘤在欧美等白种人中具有较高的发病率，但近年来黑色素瘤在我国的发病率成倍增长，每年有新发病例约2万例4。因此黑色素瘤已经成为危害我国人民健康的疾病之一。原发性恶性黑色素瘤在临床上主要分为四型：肢端雀斑痣样黑色素瘤、恶性雀斑痣样黑色素瘤、结节性黑色素瘤和表浅扩散性黑素瘤。在亚洲人和有色人种中，原发于皮肤的恶性黑色素瘤约占50%-70%，最常见的原发部位为肢端黑色素瘤，即足底、足趾、手指末端及甲下等部位，其次为粘膜黑色素瘤，如直肠、口与鼻咽等部位。　　Hippo信号通路主要成分是核心激酶链，包括LATS1/2(large tumor suppressor1/2)、MST1/2(mammalian STE20-like protein kinase)、MOB(MOB kinase activator)和SAV1(human Salvador homology1),上述核心激酶能够调控器官的大小、维持细胞增殖和凋亡的平衡以及能够调控细胞之间接触性的连接作用。Hippo信号通路能够维持表皮真皮交界处基底膜的黑素细胞密度。YAP（Yes-associated protein）是Hippo信号通路的转录激活因子。黑素细胞和大部分恶性黑色素瘤细胞系都表达 YAP蛋白。综上所述，YAP蛋白在黑色素瘤的发生和发展中发挥着重要的作用。　　低密度脂蛋白受体相关蛋白-1（Low-density lipoprotein receptor-related protein-1，LRP1）是一类具有清除细胞因子和信号传导功能的细胞膜受体，可以介导多种细胞外基质中的分子内吞及代谢。LRP1在癌症中发挥的作用是具有争议性的，由于LRP1介导的内吞可以减少细胞外基质中蛋白酶的积累，有研究报道LRP1是抑制肿瘤细胞侵袭的一种关键受体分子。也有报道证明，LRP1可以促进肿瘤细胞的粘附，从而促进肿瘤细胞的侵袭。而LRP1在黑色素瘤发病中所起到的作用少有报道。　　在本研究中，我们发现在黑色素瘤 A375细胞中分别沉默/过表达 YAP基因和LRP1基因后，黑色素瘤A375细胞的增殖功能和转移功能相对于正常表达YAP蛋白和LRP1蛋白的A375细胞有所减弱/增强，凋亡增强/减弱。我们进一步研究了YAP和LRP1蛋白之间的联系以及LRP1蛋白作为黑色素瘤侵袭和转移以及临床诊断治疗预后的指标的可能性。　　目的：1.明确沉默/过表达YAP基因和LRP1基因后黑色素瘤A375细胞的功能实验的一致性；2.明确YAP蛋白和LRP1蛋白在恶性黑色素瘤皮肤组织芯片中和正常皮肤组织芯片中的表达情况；3.明确YAP蛋白和LRP1蛋白之间的关系，即YAP基因通过激活LRP1启动子而促进LRP1蛋白表达；4.过表达LRP1蛋白可以逆转沉默YAP基因后黑色素瘤细胞A375改变的增殖、凋亡和转移能力。　　方法：1.分别沉默/过表达黑色素瘤细胞A375的YAP基因和LRP1基因，测试MTT增殖实验、Caspase3/7凋亡实验、划痕实验和Transwell实验；2.利用免疫组化实验（IHC）测试组织芯片上正常皮肤组织和恶性黑色素瘤皮肤组织的 YAP蛋白和LRP1蛋白的表达情况；3.利用RT-PCR技术和Western-blot技术测定YAP基因沉默后黑色素瘤A375细胞YAP和LRP1的蛋白表达和mRNA和的情况；利用免疫荧光技术观察YAP和LRP1蛋白是否有表达共定位；利用蛋白抑制剂CHX分别处理空白对照的黑色素瘤A375细胞和YAP基因过表达的黑色素瘤A375细胞，在0h、1h、2h、4h、8h、24h利用Western-blot技术检测YAP蛋白和LRP1蛋白的表达情况；利用双荧光酶报告基因测试检测LRP1启动子（-2000bp to+150bp）在YAP基因敲除和过表达的黑色素瘤A375细胞中的激活情况；4.过表达LRP1基因能逆转沉默YAP基因后削弱的致癌特性。　　结论：YAP蛋白和LRP1蛋白均能促进黑色素瘤A375细胞的增殖和转移，抑制凋亡；YAP基因通过激活LRP1的启动子促进黑色素瘤细胞A375增殖和转移，抑制凋亡；LRP1蛋白可能成为黑色素瘤潜在的肿瘤标志物以及黑色素瘤诊断治疗的靶蛋白。