【摘 要】
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石斛酚是铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)中重要药用成分之一。有关铁皮石斛中石斛酚的优化提取、积累规律、药用价值等方面的研究有重要的理论和应用价值。本研究通过GC-MS和HPLC-DAD技术对铁皮石斛中石斛酚进行定性、定量分析,采用超声辅助提取和响应面法优化设计建立铁皮石斛石斛酚的测定方法,并对铁皮石斛及石斛枫斗的石斛酚含量进行检测。此外,研究铁皮
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石斛酚是铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)中重要药用成分之一。有关铁皮石斛中石斛酚的优化提取、积累规律、药用价值等方面的研究有重要的理论和应用价值。本研究通过GC-MS和HPLC-DAD技术对铁皮石斛中石斛酚进行定性、定量分析,采用超声辅助提取和响应面法优化设计建立铁皮石斛石斛酚的测定方法,并对铁皮石斛及石斛枫斗的石斛酚含量进行检测。此外,研究铁皮石斛提取物和石斛酚对人胃癌细胞系SGC-7901细胞增殖的抑制作用,为进一步开发利用铁皮石斛及其活性成分石斛酚提供理论基础。主要研究结论如下:1.通过GC-MS鉴定铁皮石斛的石斛酚。经检测铁皮石斛提取物与石斛酚对照品在38 min时均有峰分离,且具有相同的特征离子。说明铁皮石斛中含有石斛酚。2.建立HPLC-DAD方法检测铁皮石斛中石斛酚。检测条件为:流动相:色谱乙腈(B)和0.1%甲酸水溶液(A);洗脱程序:0min~40min,B从5%至80%;流速:1.0mL/min;柱温:25℃;进样量:20μL。石斛酚的紫外最大吸收波长为279 nm。方法学验证结果显示该检测方法可靠。3.优化了铁皮石斛石斛酚提取工艺,分析甲醇浓度、料液比、提取温度与时间对提取效率的影响。经响应面优化获得的最优提取条件为:甲醇浓度92.98%、料液比27.2mL/g、提取温度 41.41℃。4.铁皮石斛组培苗的石斛酚在苗发育初期含量最高;栽培的铁皮石斛叶中石斛酚的含量显著高于茎,一年生叶中含量为4.7942 μg/g,三年生茎中含量为0.8978 μg/g;霍山石斛枫斗的石斛酚含量显著高于其他三个品种枫斗。5.铁皮石斛组培苗及四种石斛枫斗的提取物除铜皮石斛枫斗外,对人胃癌细胞系SGC-7901均呈现不同程度的抑制作用;石斛酚标准品不同时间对SGC-7901抑制作用的IC50值分别为86.78 μg/mL(48 h)和20.61 μg/mL(72 h);激光共聚焦和流式细胞仪检测表明石斛酚会诱导SGC-7901细胞凋亡。
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