预防HIV-1性传播的化合物ZCS的分子作用机理研究

来源 :昆明理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:vay_b
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ZCS是一种聚阴离子硫酸酯化多糖,平均分子量为24000。体外活病毒实验表明,ZCS在体外可强烈的抑制HIV-1复制。在此基础上,为了阐明ZCS与HIV-1相互作用的分子作用机理,本文通过利用SPR及ELISA技术初步研究了ZCS与多个潜在靶点的相互作用。主要研究结果如下:(1)ZCS抑制gp120与CD4结合。在SPR体系中,ZCS能够明显的抑制X4和R5两种嗜性的HIV-1的gp120与CD4的结合,抑制率分别为82.3%(gp120ⅢB)和94.3%(gp 120ADA)。(2)ZCS能与BSA结合,使BSA的荧光发生猝灭,猝灭类型为静态猝灭。ZCS能与BSA稳定结合,与BSA按照1:1.27的比例形成配合物。ZCS与BSA的作用距离为4.34nm。ZCS与BSA的作用力以疏水作用力为主。(3)ZCS与gp120强烈的结合。通过BIAevaluation4.1软件进行动力学分析,gp120ⅢB与ZCS的亲和系数KD为136nM;gp120ADA与ZCS的亲和系数KD为442nM。ZCS与gp120ⅢB的亲和力高于其与gp120ADA的亲和力。(4)ZCS与V3可变区强烈的结合。通过BIAevaluation 4.1软件进行动力学分析,V3ⅢB与ZCS的亲和系数KD为33.1nM;V3 ADA与ZCS的亲和系数KD为20.0nM;V3 GF-6(V3保守序列,GPGRAF)与ZCS的亲和系数KD为95.3nM。ZCS与V3 ADA的亲和力大于V3ⅢB。(5)CD4与ZCS有较弱的亲和力。通过BIAevaluation 4.1进行动力学分析,CD4与ZCS的亲和系数为1940nM。(6)ZCS能够抑制HIV-1逆转录酶的活性。由Graphad Prism 5软件计算的结果得出ZCS抑制HIV-逆转录酶活性的ICso为7.437±1.042μg/ml。
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