大鼠眶下神经慢性压迫性损伤中相关P2受体表达水平的动态研究

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目的探讨P2X2受体、P2X3受体和P2Y1受体在三叉神经痛模型大鼠中三叉神经节(TG)神经元内表达的动态变化,以了解初级感觉神经元上P2X2受体、P2X3受体和P2Y1受体在慢性压迫性损伤大鼠眶下神经模型(CCI-ION)所致的三叉神经痛中的可能作用及其变化规律,为三叉神经痛的临床治疗提供新的理论依据。方法雄性SD大鼠52只,随机分成9组。其中正常对照组4只,不做任何处理;手术组和假手术组按照术后时间点随机分成8组,每组6只。所有的大鼠同时饲养,根据实验设计先后手术。制备慢性压迫性损伤大鼠眶下神经模型(手术组),每组四只模型大鼠,结扎右侧眶下神经;两只假手术大鼠,同样方法暴露眶下神经但不做结扎(假手术组)。在3天内将各组实验动物麻醉后断头处死,开颅取出相应的三叉神经节。采用行为学观察、HE染色评价造模方法,免疫组化方法分别测定每组TG上不同时期P2X2受体、P2X3受体和P2Y1受体的表达情况。采用Prism 3.0软件对实验数据进行统计学处理。结果通过免疫组织化学染色的方法,观察到:①在空白对照组,三种受体均有免疫阳性细胞表达,阳性染色较弱。其中P2X3受体仅在中、小直径神经元中表达;P2X2受体和P2Y1受体在大、中、小直径神经元中均有表达,以大直径神经元为主。②P2X2受体、P2X3受体和P2Y1受体的表达量在手术侧各时间段均高于正常对照组。其中P2X2受体和P2Y1受体在小直径神经元中表达量显著性地增加,P2X3受体仍仅表达在中、小直径神经元。③手术侧与假手术组各时间段的P2X2受体、P2X3受体和P2Y1受体表达量变化存在差异。手术侧的P2X3受体快速升高后并维持在较高表达水平;手术侧的P2X2受体和P2Y1受体增加速度较缓,后期又逐渐回落。总体上手术侧该三种受体各时间段的表达量均高于假手术组。④手术侧与手术对侧各时间段的P2X2受体、P2X3受体和P2Y1受体表达量变化差异较小。P2X2受体和P2X3受体在造模手术后的前期手术侧明显地高于手术对侧,在造模后期两者的变化趋于一致。结论通过对CCI-ION模型中P2X2受体、P2X3受体和P2Y1受体在三叉神经节神经元内的表达量的动态变化的观察,发现模型组大鼠TG神经节中P2X2、P2X3、P2Y1受体表达均出现不同程度的上调,提示这三种受体可能都参与了三叉神经痛的诱发、痛觉传递过程,其中P2X2可能主要参与急性痛或炎性痛, P2Y1受体主要参与疼痛的维持,而P2X3对急性痛及痛疼的维持都起重要作用。
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