尿酸减轻6-OHDA介导PC12细胞氧化损伤作用机制的研究

来源 :苏州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangshaoj2005
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第一部分尿酸减轻6-OHDA对PC12细胞的氧化损伤作用目的:评价尿酸减轻6-OHDA对PC12细胞的氧化损伤作用。方法:采用高分化PC12细胞制作帕金森病细胞模型,分为对照组(PBS组)、6-OHDA(100μmol.L-1)组、尿酸(200μmol.L-1)组和6-OHDA(100μmol.L-1)+尿酸(200μmol.L-1)组,分别作用于6h、12h和24h。采用比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放量,ELISA法测定8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy 2’-deoxyguanosine,8-OHdG)含量,硫代巴比妥酸法测定脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量。结果:100μmol.L-1 6-OHDA作用于PC12细胞12h、24h后,与对照组相比,LDH释放显著增加(757.57±27.77 U/L vs 175.57±10.50 U/L,874.83±16.93 U/L vs 161.76±9.71 U/L,P<0.05)、8-OHdG生成增多(66.55±4.08 ng/L vs 19.61±2.04 ng/L,82.88±5.40ng/L vs 20.97ng/L±5.14 ng/L,P<0.05)、MDA生成量显著增加(2.96±0.14μmol/g pro vs 0.67±0.10μmol/g pro,4.22±0.35μmol/g pro vs 0.68±0.09μmol/g pro,P<0.05);尿酸组与对照组相比各项指标均无统计学差异(P>0.05);6-OHDA+尿酸组与6-OHDA组相比,LDH释放显著降低(472.73±18.18 U/L vs 757.57±27.77 U/L,522.25±16.37U/L vs 874.83±16.93U/L,P<0.05)、8-OHdG含量下降(51.59±3.12ng/L vs 66.55±4.08 ng/L,63.83±4.25 ng/L vs 82.88±5.40 ng/L,P<0.05)、MDA生成减少(2.08±0.29μmol/g pro vs 2.96±0.14μmol/g pro,2.55±0.36μmol/g pro vs 4.22±0.35μmol/g pro,P<0.05)。结论:尿酸对6-OHDA介导的PC12细胞氧化损伤具有保护作用。第二部分尿酸减轻6-OHDA介导的PC12细胞SOD及GSH活性下降目的:探讨尿酸减轻6-OHDA介导的PC12细胞氧化损伤机制。方法:采用高分化PC12细胞制作帕金森病细胞模型,分为对照组(PBS组)、6-OHDA(100μmol.L-1)组、尿酸(200μmol.L-1)组和6-OHDA(100μmol.L-1)+尿酸(200μmol.L-1)组。6-OHDA分别作用于6h、12h、24h,比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)和还原性谷胱甘肽(GSH)的活性变化。结果:100μmol.L-1 6-OHDA作用于PC12细胞12h、24h后,与对照组相比,SOD活性显著降低(13.48±0.53 U/L vs 30.40±0.53 U/L,10.02±2.16 U/L vs 30.49±0.62 U/L, P<0.05)、GSH含量显著下降(2.93±0.53μmol/g pro vs 5.72±0.35μmol/g pro,2.41±0.24μmol/g pro vs 6.23±0.40μmol/g pro,P<0.05);尿酸组与对照组相比各项指标均无统计学差异(P>0.05);6-OHDA+UA组与6-OHDA组相比,SOD活性显著增强(19.47±2.14 U/L vs 13.48±0.53 U/L,16.09±1.71 U/L vs 10.02±2.16 U/L,P<0.05),GSH活性明显增高(3.94±0.20μmol/g pro vs 2.93±0.53μmol/g pro,3.68±0.13μmol/g pro vs 2.41±0.24μmol/g pro,P<0.05)。结论:尿酸能够明显减轻6-OHDA介导的PC12细胞的SOD和GSH活性下降。
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