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无浆体（Anaplasma）是一类经蜱传播的专性细胞内寄生菌，主要寄生于牛羊等反刍动物的血细胞中，其引起的疾病被称为无浆体病。已知的无浆体病原包括边缘无浆体（A. marginale）、绵羊无浆体（A. ovis）、中央无浆体（A. centrale）、牛无浆体（A. bovis）、嗜吞噬细胞无浆体（A. phagocytophilum）和扁平无浆体（A. platys）。建立高效快速准确的诊断方法，对于该病的防控具有重要作用。实时荧光定量PCR技术具有特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、自动化程度高、速度快、全封闭反应等优点，使其很快成为疾病检测和诊断的热点技术。目前，国内外均未有检测绵羊无浆体和牛无浆体实时荧光定量PCR方法的报道。利用实验室保存的12株绵羊无浆体的gltA基因进行克隆测序。然后根据获得的绵羊无浆体和GenBank上其他相近病原体的gltA基因序列设计出针对绵羊无浆体的实时荧光定量引物和探针，建立了一种检测绵羊无浆体的实时荧光定量PCR方法。该方法特异性强，与相近病原如边缘无浆体、牛无浆体、嗜吞噬细胞无浆体、支原体、衣原体、螺旋体、巴贝斯虫（新疆分离株）和吕氏泰勒虫无交叉反应。检测灵敏度约10拷贝/μL。该方法具有较好的稳定性，组内试验和组间试验Ct值变异系数分别在在0.26％-0.97％和0.42%-1.5%。对野外采集的254份山羊血液样品分别使用该方法和普通PCR方法进行检测，阳性率分别为25.6%和9.06%，结果表明实时荧光定量PCR方法具有更高的敏感性。建立的绵羊无浆体实时荧光定量PCR方法可以有效检测绵羊无浆体感染。根据GenBank上牛无浆体及其他相近病原体16S rRNA基因序列设计出针对牛无浆体的实时荧光定量引物和探针，建立了一种检测牛无浆体实时荧光定量PCR方法。该方法特异性好，与相近病原如边缘无浆体、绵羊无浆体、嗜吞噬细胞无浆体、绵羊泰勒虫、吕氏泰勒虫、中华泰勒虫、巴贝斯虫（新疆分离株）、牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、支原体、衣原体、螺旋体和弓形虫无交叉反应。检测灵敏度约10拷贝/μL。该方法稳定性好，组内试验和组间试验Ct值变异系数分别在0.10%-1.01%和0.61%-1.88%，对野外采集的196份牛和山羊血液样品分别使用实时荧光定量PCR方法和套式PCR方法进行检测，阳性率分别为62.2%和56.6%，结果表明实时荧光定量PCR方法具有更高的敏感性。建立的牛无浆体实时荧光定量PCR方法可以有效检测牛无浆体感染。