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本研究于2012年4月~6月从浙江近海海域采用浮游植物网拖采,利用平板分离法和水滴分离法等分离海洋微藻。从中筛选出富EPA(二十碳五烯酸)的藻株,分别研究了生态因子(温度、光照、盐度)、营养盐因子(氮、磷、铁、硅)及不同生长时期对目标藻株的生长、总脂含量及脂肪酸组成的影响,旨在优化目标藻株生产EPA和PUFA(多不饱和脂肪酸)的培养条件,为大规模生产实践提供理论依据。主要结果如下:分离出10株海洋微藻,从中筛选出5株易培养且生长快的藻株,分别为大龙骨藻(Tropidoneis maxima)、咖啡双眉藻(Amphora coffeaeformis)、曼氏骨条藻(Skeletonema.munzelii)SM-1、曼氏骨条藻SM-2、成对海链藻(Thalassiosirabinata)。利用MAV培养基对这5株海洋微藻进行单种培养,培养条件:水温17~25℃,盐度25,自然光照,不充气,并对生长速率、总脂及脂肪酸组成进行了测定,最终筛选出2株富EPA的藻株,分别是曼氏骨条藻SM-1(24.83%)和SM-2(27.74%)。在pH8.05、光暗比12h:12h、MAV培养基、不充气培养条件下,进行温度、光照、盐度单因素试验,分别设置温度为10℃、15℃、20℃、25℃、30℃,光照20μmol m-2s-1、40μ mol m-2s-1、60μ mol m-2s-1、80μ mol m-2s-1、100μ mol m-2s-1、120μ molm-2s-1,盐度10、15、20、25、30、35、40,结果表明SM-1、SM-2藻株生长的最适条件分别为温度20~25℃、20℃,光强60μ mol m-2s-1,盐度30。利于2株藻总脂积累的最适条件:温度10℃,光强20μ mol m-2s-1,盐度15。利于2株藻PUFA积累的最适条件:温度15℃,光强20μmol m-2s-1,盐度15,PUFA含量最高时SM-1为46.92%、SM-2为53.01%;EPA含量最高时SM-1为19.39%、SM-2为21.31%。在温度25℃、光强60μmol m-2s-1、盐度25、pH8.05、光暗比12h:12h、充气培养条件下,进行营养盐单因素试验。在氮源为硝酸钾、氯化铵、硫酸铵和尿素,铁源为柠檬酸铁、硫酸亚铁、三氯化铁研究中,SM-1、SM-2藻株适宜氮源为硝酸钾和尿素,适宜铁源为硫酸亚铁。分别设置氮浓度为0mg/L、5mg/L、10mg/L、15mg/L、20mg/L、25mg/L、30mg/L,磷浓度0mg/L、0.5mg/L、1mg/L、1.5mg/L、2mg/L、2.5mg/L、3mg/L,铁浓度0mg/L、0.1mg/L、0.25mg/L、0.5mg/L、1mg/L,硅浓度0mg/L、0.5mg/L、1mg/L、2mg/L、4mg/L。结果表明:SM-1、SM-2藻株生长的最适条件分别为氮浓度20~25mg/L、25~30mg/L,磷浓度1.5mg/L、2mg/L,铁浓度0.5mg/L,硅浓度2mg/L~4mg/L、1mg/L。2株藻总脂积累的营养调控条件分别为缺氮,缺磷,缺硅,铁浓度0.25mg/L、1mg/L;2株藻PUFA积累的营养调控条件分别为缺硅,氮浓度10mg/L、30mg/L,磷浓度3mg/L、2.5~3mg/L,铁浓度0.25mg/L、0.5mg/L。PUFA含量最高时SM-1为49.11%,SM-2为50.48%;EPA含量最高时SM-1为17.12%,SM-2为18.39%。在温度25℃、光照60μ mol m-2s-1、光暗周期12h:12h、盐度25、pH8.05、MAV培养基,不充气培养条件下,确定SM-1、SM-2藻株的指数初期为第3天,指数末期为第5天,静止期为第7天。利于2株藻总脂积累的生长时期均为指数末期。利于EPA和PUFA积累的生长时期均为指数初期,EPA含量最高时SM-1为17.40%、SM-2为18.43%;PUFA含量最高时SM-1为32.71%、SM-2为34.84%。