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第一部分Ki67与HER2在人乳腺癌细胞系的差异表达研究目的：研究Ki67与HER2在人乳腺癌细胞系MCF-7 和 MDA-MB-231的差异表达,探讨其表达情况与乳腺癌细胞侵袭转移能力的相关性。方法：应用qPCR、Western Blot方法检测一对来源相同、侵袭转移能力不同的人乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中Ki67与HER2的mRNA和蛋白表达量,分析其差异表达与乳腺癌细胞侵袭转移能力的关系。结果：qPCR结果显示,Ki67 mRNA相对含量在具有高侵袭转移能力的MDA-MB-231细胞中约为低侵袭转移能力的MCF-7细胞中的3.31倍,其差异具有统计学意义(P<0.01)；HER2 mRNA相对含量在具有高侵袭转移能力的MDA-MB-231细胞中约为低侵袭转移能力的MCF-7细胞中的1.79倍(P<0.05)；Ki67 mRNA在两种细胞的含量差异大于HER2 mRNA在两种细胞的含量差异(3.31 vs.1.79)。Western Blot结果显示,Ki67与HER2蛋白在具有高侵袭转移能力的MDA-MB-231细胞中的表达均高于在低侵袭转移能力的MCF-7细胞中的表达与qPCR结果一致。结论：Ki67与HER2过表达与乳腺癌细胞的侵袭转移能力有一定相关性。第二部分量子点标记双分子探针技术研究乳腺癌中Ki67与HER2协同表达的预后价值目的：研究乳腺癌组织中Ki67与HER2协同表达情况,探寻两者在乳腺癌中的预后价值。方法：应用量子点标记双分子探针技术同时原位标记乳腺癌组织中Ki67和HER2,并用多光谱分析软件定量Ki67和HER2的表达,分析两者协同表达与乳腺癌患者8年无病生存(8-Disease free survival,8-DFS)的关系。结果：Ki67在癌细胞核上表达,标记成红色荧光,HER2在癌细胞膜上表达,标记成绿色荧光,两者对比明显,易于定量分析。Ki67与HER2表达量均与乳腺癌8-DFS呈负相关(P<0.05)。中位8-DFS在高Ki67高HER2亚组明显短于低Ki67高HER2亚组(11.7 vs.60.1月,P<0.05)；在高Ki67低HER2亚组短于低Ki67低HER2亚组(16.4vs.96.0月,P<0.01)；在高Ki67高HER2亚组明显短于低Ki67低HER2亚组(11.7vs.96.0月,P<0.01)；在高Ki67低HER2亚组与高Ki67高HER2亚组的差异无统计学意义(11.7vs.16.4月,P=0.586)。多因素分析显示,两者影响预后的权重不同,Ki67影响预后的风险比(Hazard ratio, HR)大约是HER2的3倍(HR 4.493 vs.1.481).结论：量子点标记探针技术有助于定量分析HER2和Ki67在乳腺癌中的协同表达,Ki67对乳腺癌预后不良的影响权重可能高于HER2。